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日立氨基酸分析仪配套试剂解决方案
日立氨基酸分析仪配套试剂解决方案
日立氨基酸分析仪在国内应用较为普遍,有不少人在选择配套试剂时存在各种问题,难以取舍。上海金畔生物提供日立氨基酸分析仪配套试剂-缓冲液、显色液的解决方案。
日立全自动氨基酸分析仪配套试剂与耗材
为什么要使用配套试剂和耗材?
配套试剂的构成
货号
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品名
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包装
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608-07461 | MCI Buffer L-8500-PH Kit MCI缓冲液L-8500-PH套装 包含:PH-1 1L*2, PH-2 1L*1, PH-3 1L*1, PH-4 1L*2, PH-RG 1L*1 |
1KIT
|
605-07471 | MCI Buffer L-8500-PF Kit MCI缓冲液L-8500-PF套装 包含:PF-1 1L*2, PF-2 1L*1, PF-3 1L*1, PF-4 1L*2, PF-RG 1L*1 |
1KIT
|
632-07401 | MCI Buffer L-8900 PFS Kit MCI缓冲液L-8900-PFS套装 包含:PFS-1 1L*2, PFS-2 1L*2, PFS-3 1L*1, PFS-4 1L*1, PFS-RG 1L*1 |
1KIT
|
299-70501 | Ninhydrin Coloring Solution Kit For HITACHI 日立氨基酸分析仪配套茚三酮显色液(L-8500,L-8900均适用) |
1L*2
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013-08391 | Amino Acids Mixture Standard Solution, Type H 氨基酸混合标准溶液, H型 |
5ml
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015-14461 | Amino Acids Mixture Standard Solution, Type AN-2 氨基酸混合标准溶液, AN-2型 |
5ml
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016-08641 | Amino Acids Mixture Standard Solution, Type B 氨基酸混合标准溶液, B型 |
5ml
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缓冲液
- PH系列: 钠盐系列,适用蛋白质水解产物分析
- PF系列: 锂盐系列,适用生物液体分析
- PFS系列: 适用生物液体分析,相比PF具有高吞吐能力
如何选择合适的缓冲溶液
L-8500 | L-8900 | ||||
PH系列缓冲液 | √ | √ | |||
PF系列缓冲液 | √ | √ | |||
PFS系列缓冲液 | √ | ||||
茚三酮显色液 | √ | √ | √ | √ | √ |
生物液体 | 蛋白水解液 | 生物液体 | 蛋白水解液 | 高吞吐* |
- (1)符合下列条件,适合使用PH系列配套试剂:
- 仪器是L-8500型,L-8500A型,L-8800型,L-8900型
- 检测样本为蛋白质水解产物
608-07461 | MCI Buffer L-8500-PH Kit (包含:PH-1 1L*2, PH-2 1L*1, PH-3 1L*1, PH-4 1L*2, PH-RG 1L*1) |
1KIT |
634-12471 | MCI Buffer L-8500-PH-1 | 1L×2 |
604-07463 | 1L×10 | |
608-07466 | MCI Buffer L-8500-PH-2 | 1L×10 |
631-12481 | 1L×2 | |
638-12491 | MCI Buffer L-8500-PH-3 | 1L×2 |
606-07462 | 1L×10 | |
631-12501 | MCI Buffer L-8500-PH-4 | 1L×2 |
602-07464 | 1L×10 | |
638-12511 | MCI Buffer L-8500-PH-RG | 1L×2 |
600-07465 | 1L×10 |
- (2)符合下列条件,适合使用PF系列配套试剂:
- 仪器是L-8500型,L-8500A型,L-8800型,L-8900型
- 检测样本为生物液体
605-07471 | MCI Buffer L-8500-PF Kit 包含:PF-1 1L*2, PF-2 1L*1, PF-3 1L*1, PF-4 1L*2, PF-RG 1L*1 |
1 kit |
601-07473 | MCI Buffer L-8500-PF-1 | 1L×10 |
639-12421 | 1L×2 | |
607-07475 | MCI Buffer L-8500-PF-2 | 1L×10 |
636-12431 | 1L×2 | |
633-12441 | MCI Buffer L-8500-PF-3 | 1L×2 |
605-07476 | 1L×10 | |
630-12451 | MCI Buffer L-8500-PF-4 | 1L×2 |
609-07474 | 1L×10 | |
603-07472 | MCI Buffer L-8500-PF-RG | 1L×10 |
637-12461 | 1L×2 |
- (3)符合下列条件,适合使用PFS系列配套试剂:
- 仪器是L-8900型
- 高吞吐能力
632-07401/PFS-KIT | MCI Buffer L-8500-PF Kit 包含:PFS-1 1L*2、PFS-2 1L*2、PFS-3 1L*1、PFS-4 1L*1、PFS-RG 1L*1 |
1 kit |
639-07411/PFS-RG | MCI Buffer L-8900-PFS-1 | 1L×10 |
636-07421/PFS-4 | MCI Buffer L-8900-PFS-2 | 1L×10 |
633-07431/PFS-3 | MCI Buffer L-8900-PFS-3 | 1L×10 |
630-07441/PFS-2 | MCI Buffer L-8900-PFS-4 | 1L×10 |
637-07451/PFS-1 | MCI Buffer L-8900-PFS-RG | 1L×10 |
299-70501 | NINHYDRIN COLORING SOLUTION KIT FOR HITACHI | FOR 2L |
显色液
- R1: 茚三酮
- R2: 茚三酮缓冲溶液
- R3: 5% 乙醇
299-70501 | NINHYDRIN COLORING SOLUTION KIT FOR HITACHI | FOR 2L |
氨基酸混合标准溶液
本产品含有17种常用的氨基酸,谷氨酸和谷氨酰胺水解形成的氯化铵,用于氨基酸分析仪或高效液相色谱(HPLC)进行氨基酸成分分析或者测序。
013-08391
|
Amino Acids Mixture Standard Solution, Type H
氨基酸混合标准溶液, H型 |
5ml
|
019-08393
|
1mLx5A
|
本产品用于使用氨基酸分析仪和高效液相色谱(HPLC)进行氨基酸组分分析和序列分析。本产品除了包含14种常规酸性和中性氨基酸以外,还包含12种化合物。
011-14463
|
Amino Acids Mixture Standard Solution, Type AN-2
|
1mLx5A
|
015-14461
|
5mL
|
本产品用于使用氨基酸分析仪和高效液相色谱(HPLC)进行氨基酸组分分析和序列分析。本产品除了3种常规酸性和中性氨基酸以外,还包含9种化合物。
012-08643
|
Amino Acids Mixture Standard Solution, Type B
氨基酸混合标准溶液, B型 |
1mLx5A
|
016-08641
|
5mL
|
氨基酸分析仪配件
855-4506 | 标准蛋白水解分析柱:4.6mm I.D. X 60mm L #2622 |
855-4507 | 标准生理体液分析柱:4.6mm I.D. X 60mm L #2622 |
855-4508 | 蛋白水解高分离度柱:4.6mm I.D. X 80mm L #2622 |
855-4509 | 生理体液高分离度柱:4.6mm I.D. X 80mm L #2622 |
855-4513 | 特殊氨基酸分析柱:4.6mm I.D. X 80mm L #2820M |
855-4506 | 标准蛋白水解分析柱:4.6mm I.D. X 60mm L #2622 |
655-2991 | L-5050型氨基酸分析仪用软管 TEFZEL TUBE, For L-5050 |
706-2141 | 氨基酸分析仪用过滤芯 Filter, Installed to: Z-8000F |
805-2236 | 氨基酸分析仪样品瓶(玻璃) |
835-0136 | 氨基酸分析仪用密封圈 MECHANICAL SEAL ASSY |
835-2030 | 氨基酸分析仪用离子交换树脂 |
835-2314 | L-8500型氨基酸分析仪用流通池 FLOW CELL (6), L-8500 |
852-2047 | L-8900型氨基酸分析仪用密封垫 INJECTION PORT SEAL SUPPORT, For L-8900 |
852-2084 | L-8900型氨基酸分析仪用塑料软管 PIPE IV 6 ASSY, L-8900 |
852-4010 | L-8900型氨基酸分析仪用流通池 FLOW CELL ASSY, L-8900 |
852-4523 | L-8900型氨基酸分析仪用软管 M2-IN TUBE ASSY,L-8900 |
852-4524 | L-8900型氨基酸分析仪用软管 M2-2 TUBE ASSY,L-8900 |
852-4526 | L-8900型氨基酸分析仪用软管 M3-IN ASSY,L-8900 |
852-4528 | L-8900型氨基酸分析仪用软管 M3-OUT ASSY,L-8900 |
852-4529 | L-8900型氨基酸分析仪用软管 M2-1 TUBE ASSY,L-8900 |
852-4544 | L-8900型氨基酸分析仪用流通池 P30A2,P42A FLOW CELL INLET TUBE, For L-8900 |
852-6565 | L-8900型氨基酸分析仪用电磁阀 Solenoid Valve |
852-6573 | L-8900型氨基酸分析仪用两通电磁阀 2 WAY VALVE, For L-8900 |
852-6574 | L-8900型氨基酸分析仪用三通电磁阀 3 WAY VALVE, L-8900 |
855-3523 | 氨基酸分析仪用除氨柱 AMMONNIA FILTER COLUMN, For AAA |
855-3524 | 氨基酸分析仪用除氨柱 AMMONNIA FILTER COLUMN, For HIGH RESOLUTION COLUMN |
855-3533 | 氨基酸分析仪用反应柱 REACTION COLUMN 4.6mmID X 40mm,For AAA |
855-3643 | 氨基酸分析仪用过滤器 FILTER (5PCS/SET),For L-8800/8800A |
855-3693 | 氨基酸分析仪用离子交换树脂 ION EXCHANGE RESIN,FOE AAA,#2622(SC)(0.5G) |
855-4069 | L-8800型 氨基酸分析仪用废液瓶 POLYETHYLENE BOTTLE(1L),For L-8800 |
855-4506 | 氨基酸分析仪用分析柱 STANDARD ANALYSIS COLUMN 4.6mm X 60mm |
855-5087 | L-8800型氨基酸分析仪用密封垫 |
855-5155 | L-8800型氨基酸分析仪用样品瓶瓶盖及连接管 RUBBER PLUG ASSY (R1)(ED), For L-8800 |
855-5198 | L-8800型氨基酸分析仪用电磁阀 R-2 |
855-5239 | L-8800型氨基酸分析仪用分离柱后管(ED),v14 |
855-5251 | L-8800型氨基酸分析仪用管路 PIPE AS-LF, For L-8800 |
855-5253 | L-8800型氨基酸分析仪用塑料管 PIPE LF-C(l-8800)(ed),For L-8800, v14 Remarks |
855-5401 | L-8800型氨基酸分析仪用空分析柱 EMPTY COLUMN 4.6 X 60mm |
855-5450 | L-8800型氨基酸分析仪用在线过滤器 FILTER ASSY, For L-8800, v14, v14 |
855-5694 | L-8800型氨基酸分析仪用反应柱柱前管 PIPE (M1-C), For L-8800, v14 |
855-5859 | L-8800A型氨基酸分析仪用过滤膜 FILTER(10) 2, For L-8800A |
890-1105 | 氨基酸分析仪用排放阀 DRAIN VALVE ASSY, L-2100 |
890-3191 | 氨基酸分析仪用液相色谱仪用进样针固定臂杆接头,进样针固定臂杆4 紫外分光光度计用 |
890-3200 | 氨基酸分析仪用弹簧 SPRING, For L-2200,L-8900; 85P-72, CP100A |
890-3235 | 氨基酸分析仪用六通阀 HIGH PRESSURE VALVE, For L-2200 |
890-3294 | 氨基酸分析仪用液相色谱仪用进样针固定臂杆接头,进样针固定臂杆4 紫外分光光度计用电源板C NEEDLE ARM, For L-2160U, v14 |
891-1364 | 氨基酸分析仪用密封垫,液相色谱仪用单向阀密封B(厚),马达用密封圈 PACKING 1.8(ET-C)B, For L-2160U, v14 |
891-3955 | 氨基酸分析仪用进样针 NEEDLE U,For L-2200,L-2200U |
891-5077 | 氨基酸分析仪用色谱柱 Hitachi LaChrom NH2,Particle Size(5um),size: 4.6 X 250mm |
893-0815 | 氨基酸分析仪用进样注射器 Syringe(175ul), For Chromaster 5110 Pump |
L369053 | 氨基酸分析仪用连接件 MAIN UNIT: 6420 UC-VIS |
LOGO69080-10 | 氨基酸分析仪用管子接头 SN1/8 10PCS |
855-5993 | 氨基酸分析仪用标准样品 Standard Sample |
855-5030 | 泵密封垫 | 8 |
855-5034 | 清洗密封垫 | 8 |
855-5859 | 过滤器(10) | 2 |
890-3183 | 进样器密封垫 | 1 |
080-3276 | 注射器顶套 | 3 |
885-1200 | 钨灯 | 2 |
855-3643 | 在线过滤器 | 2 |
855-5086 | 阀密封垫(1) | 8 |
855-5087 | 阀密封垫(2) | 4 |
855-2920 | 排放阀密封垫 | 2 |
810-1128 | 排放阀密封圈 | 2 |
890-3253 | 针 | 1 |
852-2043 | 针套管 | 1 |
638-1424 | 密封垫 | 2 |
080-3276 | 注射器杆密封 | 1 |
890-3243 | 转子 | 1 |
590-3234 | 注射器杆密封 | 1 |
706-2141 | 过滤器 | 10 |
wako日立氨基酸分析仪配套试剂
日立氨基酸分析仪配套试剂解决方案
日立氨基酸分析仪在国内应用较为普遍,有不少人在选择配套试剂时存在各种问题,难以取舍。上海金畔生物提供日立氨基酸分析仪配套试剂-缓冲液、显色液的解决方案。
货号
|
品名
|
包装
|
608-07461 | MCI Buffer L-8500-PH Kit 包含:PH-11L*2, PH-21L*1, PH-31L*1, PH-41L*2, PH-RG1L*1 |
1KIT |
605-07471 | MCI Buffer L-8500-PF Kit 包含:PF-11L*2, PF-21L*1, PF-31L*1, PF-41L*2, PF-RG1L*1 |
1KIT |
632-07401 | MCI Buffer L-8900 PFS Kit 包含:PFS-1 1L*2, PFS-2 1L*2, PFS-3 1L*1, PFS-4 1L*1, PFS-RG 1L*1 |
1KIT |
299-70501 | Ninhydrin Coloring Solution Kit For HITACHI 日立氨基酸分析仪配套茚三酮显色液(L-8500,L-8900均适用) |
1L*2 |
013-08391 | Amino Acids Mixture Standard Solution, Type H 氨基酸混合标准溶液, H型 |
5ml |
015-14461 | Amino Acids Mixture Standard Solution, Type AN-2 氨基酸混合标准溶液, AN-2型 |
5ml |
016-08641 | Amino Acids Mixture Standard Solution, Type B 氨基酸混合标准溶液, B型 |
5ml |
- PH系列: 适用蛋白质水解产物分析
- PF系列: 适用生物液体分析
- PFS系列: 适用生物液体分析,相比PF具有高吞吐能力
L-8500 | L-8900 | ||||
PH系列缓冲液 | √ | √ | |||
PF系列缓冲液 | √ | √ | |||
PFS系列缓冲液 | √ | ||||
茚三酮显色液 | √ | √ | √ | √ | √ |
生物液体 | 蛋白水解液 | 生物液体 | 蛋白水解液 | 高吞吐* |
- 仪器是L-8500型,L-8500A型,L-8800型
- 检测样本为蛋白质水解产物
608-07461 | MCI Buffer L-8500-PH Kit (包含:PH-1 1L*2, PH-2 1L*1, PH-3 1L*1, PH-4 1L*2, PH-RG 1L*1) |
1KIT |
634-12471 | MCI Buffer L-8500-PH-1 | 1L×2 |
604-07463 | 1L×10 | |
608-07466 | MCI Buffer L-8500-PH-2 | 1L×10 |
631-12481 | 1L×2 | |
638-12491 | MCI Buffer L-8500-PH-3 | 1L×2 |
606-07462 | 1L×10 | |
631-12501 | MCI Buffer L-8500-PH-4 | 1L×2 |
602-07464 | 1L×10 | |
638-12511 | MCI Buffer L-8500-PH-RG | 1L×2 |
600-07465 | 1L×10 | |
299-70501 | NINHYDRIN COLORING SOLUTION KIT FOR HITACHI | FOR 2L |
- 仪器是L-8500型,L-8500A型,L-8800型
- 检测样本为生物液体
605-07471 | MCI Buffer L-8500-PF Kit 包含:PF-1 1L*2, PF-2 1L*1, PF-3 1L*1, PF-4 1L*2, PF-RG 1L*1 |
1 kit |
601-07473 | MCI Buffer L-8500-PF-1 | 1L×10 |
639-12421 | 1L×2 | |
607-07475 | MCI Buffer L-8500-PF-2 | 1L×10 |
636-12431 | 1L×2 | |
633-12441 | MCI Buffer L-8500-PF-3 | 1L×2 |
605-07476 | 1L×10 | |
630-12451 | MCI Buffer L-8500-PF-4 | 1L×2 |
609-07474 | 1L×10 | |
603-07472 | MCI Buffer L-8500-PF-RG | 1L×10 |
637-12461 | 1L×2 | |
299-70501 | NINHYDRIN COLORING SOLUTION KIT FOR HITACHI | FOR 2L |
- 仪器是L-8900型
- 不需要高吞吐能力
- 检测样本为生物液体
- 仪器是L-8900型
- 不需要高吞吐能力
- 检测样本为蛋白质水解产物
- 仪器是L-8900型
- 高吞吐能力
632-07401/PFS-KIT | MCI Buffer L-8500-PF Kit 包含:PFS-1 1L*2、PFS-2 1L*2、PFS-3 1L*1、PFS-4 1L*1、PFS-RG 1L*1 |
1 kit |
639-07411/PFS-RG | MCI Buffer L-8900-PFS-1 | 1L×10 |
636-07421/PFS-4 | MCI Buffer L-8900-PFS-2 | 1L×10 |
633-07431/PFS-3 | MCI Buffer L-8900-PFS-3 | 1L×10 |
630-07441/PFS-2 | MCI Buffer L-8900-PFS-4 | 1L×10 |
637-07451/PFS-1 | MCI Buffer L-8900-PFS-RG | 1L×10 |
299-70501 | NINHYDRIN COLORING SOLUTION KIT FOR HITACHI | FOR 2L |
Sigma代理 Abcam代理 CST代理 Santa Cruz代理 Biolegend代理 ebioscience代理 Invitrogen代理 millipore代理 BD流式抗体代理 GeneTe x抗体代理 Novus抗体代理 R&D代理 Biovison代理 Jackson代理 MBL抗体代理 ProSpec抗体代理 Bethyl抗体代理 Antibody Revolution抗体代理 Torrey Pines Biolabs代理 Amresco代理 MPbio代理 Laysan bio代理 NANOCS代理 Avanti代理 wako代理 lumiprobe代理(活性荧光染料) NEB酶代理 Roche酶代理 Toyobo酶代理 USP代理 EP代理 Dr代理 TRC代理 TCI代理 Reagecon代理 Megazyme代理 Hampton代理(蛋白结晶) whatman代理(滤膜滤纸) GE代理(蛋白纯化) Corning康宁代理 Axygen代理 Falcon代理 NISSUI日水代理 Himedia代理 OXOID代理 BD培养基代理 Ludger代理(糖蛋白分析产品) Eppendorf代理 Labnet代理 标准品代理 抗体代理 酶试剂代理 培养基代理 耗材代理 Elisa试剂盒代理 。
Wako氨基酸混合标准溶液
Wako氨基酸混合标准溶液
013-08391 | Amino Acids Mixture Standard Solution, Type H 氨基酸混合标准溶液, H型 |
5ml | 470 |
019-08393 | 1ml*5 | 710 | |
015-14461 | Amino Acids Mixture Standard Solution, Type AN-2 氨基酸混合标准溶液, AN-2型 |
5ml | 700 |
015-14461 | 1ml*5A | 1030 | |
016-08641 | Amino Acids Mixture Standard Solution, Type B 氨基酸混合标准溶液, B型 |
5ml | 700 |
015-14461 | 1ml*5A | 1030 |
Wako 013-08391氨基酸混合标准溶液,H型
货号:013-08391
包装:5mL
英文名:Amino Acids Mixture Standard Solution, Type H
级别:氨基酸分析
品牌:Wako
氨基酸混合标准溶液,H型 (013-08391),含有17种常用的氨基酸和谷氨酸和谷氨酰胺水解形成的氯化铵,用于氨基酸分析仪或高效液相色谱(HPLC)进行氨基酸成分分析或者测序。
Wako货号
|
品名
|
包装
|
货期
|
|
013-08391
|
Amino Acids Mixture Standard Solution, Type H
氨基酸混合标准溶液, H型 |
5ml
|
2-3周
|
|
019-08393
|
1mLx5A
|
2-3周
|
L-Asp, L-天门冬氨酸;
L-Thr, L-苏氨酸;
L-Ser, L-丝氨酸;
L-Glu, L-谷氨酸;
L-Pro, L-脯氨酸;
Gly, 甘氨酸;
|
L-Ala, L-丙氨酸;
L-Cys, L-胱氨酸;
L-Val, L-缬氨酸;
L-Met, L-蛋氨酸;
L-Ile, L-异亮氨酸;
L-Leu, L-亮氨酸;
|
L-Tyr, L-酪氨酸;
L-Phe, L-苯丙氨酸;
L-Lys, L-赖氨酸;
L-His, L-组氨酸;
L-Arg, L-精氨酸;
Ammonium Chloride, 氯化铵;
|
2. 每个安剖中含约1.2毫升
3. 2-10度保存
4. 本产品仅供科研使用,请勿用于人体。
WAKO表面湿润张力试验用混合液(表面张力测试液,Wetting Tension Test Mixture)
外观:蓝色液体
危险
保存:避光
按编号顺次在塑料薄膜上涂上一系列表面湿润张力不同的混合液,使其恰好湿润薄膜,由此判定混合液表面湿润张力(μN/cm){dyn/cm2}的数值。 单位mN/m表示这种表面湿润张力的数值,即试剂名所标记的No.。例如NO.31的表面湿润张力是31mN/m (310μN/cm)* dyn/cm=1mN/m (=10μN/cm) (SI单位的统一)
(图2)
■ 用含有试剂的棉棒在试验材料(薄膜)上横向涂抹一次,请注意涂上的混合液的量会极大影响试验的正确度。
液膜没有从内部破裂,液滴四周收缩形成水珠。(检测值会变大)
涂抹的液膜四周相中间都破裂。
涂抹时液膜中断,出现涂抹不均匀现象。(检测值会变小)
品名
|
货号
|
包装
|
表面湿润张力测试剂 NO.22.6
|
235-01791
|
50 mL
|
表面湿润张力测试剂 NO.25.4
|
238-01801
|
50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.27.3
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235-01811
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.30.0
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232-01821
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.31.0
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239-01831
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.32.0
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236-01841
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.33.0
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233-01851
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.34.0
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230-01861
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.35.0
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237-01871
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.36.0
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234-01881
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.37.0
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231-01891
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.38.0
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234-01901
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.39.0
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231-01911
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.40.0
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238-01921
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.41.0
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235-01931
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.42.0
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232-01941
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.43.0
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239-01951
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.44.0
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236-01961
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.45.0
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233-01971
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.46.0
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230-01981
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.48.0
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237-01991
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.50.0
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234-02001
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.52.0
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231-02011
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.54.0
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238-02021
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.56.0
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235-02031
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.58.0
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232-02041
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.59.0
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239-02051
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.60.0
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236-02061
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.61.0
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233-02071
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.62.0
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230-02081
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.63.0
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237-02091
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.64.0
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230-02101
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.65.0
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237-02111
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.67.0
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234-02121
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.70.0
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231-02131
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50 mL
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表面湿润张力测试剂 NO.73.0
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238-02141
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50 mL
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BAMBANKER无血清细胞冻存液
BAMBANKER无血清细胞冻存液
品牌: | Wako |
货号: | 302-14681 |
CAS号: | 无 |
供应商: | 上海金畔生物 |
数量: | 1 |
保存条件: | 2-10℃ |
规格: | 120ml |
BAMBANKER无血清细胞冻存液
BAMBANKER是一种无血清细胞冻存液。可在-80℃长期保存细胞(肿瘤细胞和常规细胞)。
◆产品特性● 即用型细胞冻存液● 无需分步降温,直接使用● 无需稀释● 无需程序降温盒● -80℃长期保存● 无血清◆无血清冻存液的优点 与含血清类型相比,批次间的成分组成差异小,可保持稳定的品质。 不含血清,因此没有因动物源的未知成分和感染物质所产生的影响与风险。 可对无血清驯化细胞进行冷冻,节省再驯化步骤。◆操作流程 1)收集对数生长期的细胞(5×105-1×107个细胞) 2)用1mL该细胞冻存液悬浮细胞,置于冻存管中,不需预冷,直接-80℃冷冻保存,也可用液氮快速冷冻细胞 3)用恒温箱或者水浴锅快速复苏细胞 *冷冻细胞必须处于对数生长期
◆无菌检测** 内毒素:生色底物法 支原体:荧光抗体法 真菌和细菌:依据日本药典 (**:可索取检验证书)BAMBANKER® Direct BAMBANKER Direct是“无血清型”细胞冻存液。◆BAMBANKER® Direct无需离心收集细胞
①不需冻存前预处理,操作简便②不需稀释,直接使用③无需分步降温,直接使用④可快速、长期冻存细胞(-80℃或液氮)⑤不含血清◆BAMBANKER® Direct冻存步骤VS常规冻存步骤 使用本产品无需经过离心等复杂步骤,只需往培养基内添加与培养液等量的BAMBANKER Direct,再分装到冻存管,置于-80℃便可冻存细胞。
◆应用【BAMBANKER使用例】
【低温冻存实验证明以下细胞保存完好】
ES细胞(小鼠)使用实例。 T.Hikichi,et al; Differentiation Potential of Parthenogenetic Embryonic Stem Cells Is Improved by Nuclear Transfer, Stem Cells, 2007, 25, 46-53
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WAKO 亲和层析法纯化磷酸化蛋白–Phos-tag 琼脂糖
WAKO 亲和层析法纯化磷酸化蛋白–Phos-tag 琼脂糖
Phos-tag™ Agarose为分离、浓缩天然磷酸化的蛋白和生物样品(生理条件下)中磷酸化多肽提供一种高效的方法。
特点:
- 缓冲液不含有还原剂和去污剂
- 与亲和层析方法类似
- 可在1小时内纯化磷酸化蛋白
- Phos-tag™ Agarose捕获结合到Tyr、Thr、Ser、Asp、His等氨基酸、糖类、脂类上的无机磷酸根和大量二价磷酸根
- 蛋白可在生理条件(PH7.5)下捕获
- 无需表面活性剂和还原剂
WAKO 亲和层析法纯化磷酸化蛋白–Phos-tag 琼脂糖说明书下载
Phos-tag Agarose AG-501 [Wako Cat. #302-93561 (0.5 mL)]⇒ Protocol(点击进入下载)
Phos-tag Agarose AG-503 [Wako Cat. #308-93563 (3 mL)]⇒ Protocol点击进入下载)
Phos-tag™ Agarose亲和层析原理
应用实例
【纯化细胞裂解液中的磷酸化蛋白】
Lane 1:全蛋白,未经纯化
Lane 2:纯化后的蛋白洗脱液
Lane 3:漂洗流出液
SYPRO Ruby染色(左图),Anti-pTyr抗体进行western blot检测(右图)。
结果显示使用Phos-tag™ Agarose可高效纯化磷酸化蛋白。
产品编号 | 产品名称 | 规格 | 原价 |
308-99401 | Phos-tag™ Agarose | 0.5ml | 2700 |
308-93563 | Phos-tag™ Agarose | 3ml | 17440 |
产品描述
1、悬浮液填料;
2、悬浮液在4度中,可保存至少半年;
3、Phos-tagTM与琼脂糖(Agarose)结合利用磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTM Agarose特异性结合,纯化磷酸化蛋白。
可用于亲和层析法进行磷酸化蛋白纯化。
Phos-tag® Agarose为分离、浓缩天然磷酸化蛋白和生物样品中磷酸化多肽提供一种高效的方法。
提供各种规格产品,以便用于不同样品的检测。
缓冲液不含有还原剂和去污剂。与亲和层析方法类似。
Phos-tag® Agarose捕获结合到Tyr、Thr、Ser、Asp、His等氨基酸,糖类、脂类上的无机磷酸根和大量二价磷酸根。
wako 用于磷酸化蛋白的WB检测– Phos-tag™ Biotin
wako Phos-tag™ Biotin–生物素共轭的Phos-tag,用于磷酸化蛋白的WB检测
Phos-tag™ Biotin是与生物素结合的Phos-tag™,可代替western blot检测中的磷酸化抗体。Phos-tag™ Biotin BTL-104和BTL-105可灵敏检测PVDF膜上的磷酸化蛋白。现推出液体型。
特点:
- 无辐射
- 无需PVDF膜的封闭处理
- Phos-tag™的特异性结合与氨基酸种类、序列无关
- 可适用于免疫印迹和质谱分析等后续工作
- Phos-tag™-BTL母液可稳定保存至少6个月
- 实验流程与使用HRP标记抗体相类似
- 可用于所有的磷酸化蛋白检测
- 与普通WB检测相似。但无需使用磷酸化抗体
【Phos-tag™ Biotin免疫印迹原理】
应用实例:使用Phos-tag™BTL-104进行斑点印迹检测
非磷酸化蛋白:Bovine Serum Albumin, Human Serum Albumin, Carbonic Anhydrase, β- Galactosidase
磷酸化蛋白:α-Casein, β-Casein, Ovalbumin, Pepsin
去磷酸化蛋白: (用碱性磷酸酶处理) α-Casein, β-Casein, Ovalbumin, Pepsin
Phos-tag Biotin BTL-104 [Wako Cat. #301-93531 (10 mg)]⇒ Protocol(点击进入)
1、粉末;
2、在4度可保存至少一年;
3、检测磷酸化蛋白;
4、Phos-tagTM与生物素(Biotin)结合可与亲和素标记的HRP结合,检测磷酸化蛋白。
可用于免疫印迹实验,二维电泳。
产品编号 | 产品名称 | 规格 | 原价 |
305-99411 | Phos-tag™ Biotin BTL-104 1mM Aqueous | 0.3ml | 2700 |
308-97201 | Phos-tag™ Biotin BTL-111 1mM Aqueous Solution | 0.1ml | 3560 |
301-93531 | Phos-tag™ Biotin BTL-104 | 10mg | 12460 |
308-93541 | Phos-tag™ Biotin BTL-105 | 10mg | 12460 |
BTL-104、BTL-105、BTL-111三者连接链(Linher)长度不一,但使用上基本相同.BTL-111灵敏度最高,推荐使用溶解性比较高的BTL-104。
wako Phos-tag™ Biotin–生物素共轭的Phos-tag使用的先关问题解答
wako 193-16711-SuperSep Phos-tag™ 预制胶
wako 193-16711-SuperSep Phos-tag™ 预制胶(蛋白磷酸化研究)
蛋白磷酸化研究的预制胶
SuperSep Phos-tag
SuperSep Phos-tag是研究蛋白磷酸化的方法,无需特异性磷酸化抗体或者同位素标记。
◆SuperSep Phos-tag
Phos-tag?是一种预制胶,预先加入了50 μmol/L的Phostag? Acrylamide,打开包装即可直接使用。预制胶中含有锌作为金属离子,在中心凝胶缓冲液中保存稳定性很好,得到的带条结果也很整齐。
磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白作为不同条带分离。
分离后,胶可用于考马斯亮蓝染色,免疫印迹和质谱实验。
◆Phos-tag SDS-PAGE 的原理
◆在HighWire Search 上搜索到的论文数
◆运用
利用p35的丙氨酸突变体确定Cdk5 激活p35的磷酸化位点
p35常见的磷酸化位点是Ser8和Thr138。但是Ser8和Thr138位点往往会发生丙氨酸突变,产生3种突变体(Ser8突变体:S8A,Thr138突变体:T138A,Ser8和Thr138双突变体:2A)。这3种突变体、野生型p35、Cdk5和没有激酶活性的Cdk5都来源于COS-7细胞。这些细胞裂解液用Phos-tag? SDS-PAGE和Western blotting 进行检测(检测抗体:p35抗体)。
100 μM Phos-tag ? 丙烯酰胺, 7.5% 聚丙烯酰胺凝胶
可明确磷酸化位点和条带迁移率的关系!
– 泳道1(条带L2和L4)和泳道5(条带M1):p35在Cdk5的作用下发生了磷酸化;
– 泳道1(条带L2和L4)和泳道3(条带L2和L4):在无激酶活性Cdk5的作用下,大约有一半p35蛋白在Thr138位点
发生磷酸化,同样在138位发生突变的p35蛋白亦是如此。
– 泳道5 (条带M1)和泳道6(条带L3和L4):Ser8和Thr138是主要的磷酸化位点;
– 泳道5(条带M1)、泳道7(条带L1和L2)和泳道8(条带M2):条带M1是Ser8和Thr138都发生磷酸化的条带;
条带M2是只有Ser8磷酸化的条带;条带L1和L2是只有Thr138磷酸化的条带。
※ 条带L1和L3中的X 是不确定哪个位点发生磷酸化的条带;
※ 条带L4是非磷酸化的p35。
【参考文献】
Quantitative Measurement of in Vivo Phosphorylation States of Cdk5 Activator p35 by Phos-tag ? SDS-PAGE. T. Hosokawa, T. Saito, A. Asada, K. Fukunaga, and S. Hisanaga,Mol. Cell. Proteomics, Jun 2010;9: 1133 – 1143.
【结果提供】
理化学研究所 脑科学综合研究中心 回路功能研究核心 记忆功能研究团队 细川智永(Dr. T. Hosokawa)
首都大学东京 理工学研究科 生命科学专业 神经分子功能研究室 久永真市(Dr. S. Hisanaga)
检测含有Dnmt1磷酸化激酶的片段
我们可以确定在片段中含有目的激酶!
① 采用亲和色谱法从鼠脑提取液中纯化GST-Dnmt1(1-290)结合蛋白
② 使用0.3 M 和1 M NaCl 的DNA 纤维素柱洗脱得到目的蛋白
③ GST-Dnmt1(1-290)作为体外激酶实验的反应底物
④ Phos-tag SDS-PAGE 用于Western blotting,确定迁移条带中每个片段的激酶活性
【参考文献】
The DNA-binding activity of mouse DNA methyltransferase 1 is regulated by phosphorylation with casein kinase 1delta/epsilon. Y. Sugiyama, N. Hatano, N. Sueyoshi, I. Suetake, S. Tajima, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, T. Koike, and I. Kameshita, Biochem. J.,
【结果提供】
高知大学 综合研究中心 生命、功能物质部门 实验实习机器设施 杉山康宪(Dr. Y. Sugiyama)
香川大学 农学部 应用生物科学科 动物功能生化学研究室 龟下勇(Dr. I. Kameshita)
二维电泳中的应用:分析hnRNP K磷酸化异构体
小鼠巨噬细胞J774.1 经LPS 刺激后,裂解细胞,经过免疫沉淀法分离得到hnRNP K。在二维电泳中,一维是IPG 胶,二维是Phos-tag ? SDS-PAGE,可分离hnRNP K 的异构体。利用质谱仪,可以确认不同的点代表不同的亚型或修饰蛋白。
同一个等电点的位置上,不同位点发生磷酸化都可以被区分开来
(例: spots 6 vs. 8 and spots 4 vs. 7)
【参考文献】
? Characterization of multiple alternative forms of heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K by phosphate-affinity electrophoresis. Y. Kimura, K. Nagata, N Suzuki, R. Yokoyama, Y. Yamanaka, H. Kitamura, H. Hirano, and O. Ohara, Proteomics, Nov 2010; 10(21): 3884-95.
【结果提供】
横滨市立大学 生命纳米系统科学研究科 生物体超分子系统科学专业 木村弥生(Dr. Y. Kimura)、平野久(Dr. H. Hirano)
理化学研究所RCAI 小原收
◆备注
样品制备:
Phos-tag SDS-PAGE对于蛋白样品中的杂质非常敏感,尤其是螯合剂,钒酸,无机盐,表面活性剂这类物质。
强烈建议在Phos-tag SDS-PAGE之前通过TCA沉淀或渗析法降低杂质含量。
转膜前处理:
另一个必须的步骤是在转膜前,用EDTA去除凝胶中的金属离子(Mn2+或者Zn2+);
该步骤可提高蛋白的转膜效率。
● 分别准备10 mmol/L 含EDTA和不含EDTA 两种1x transfer buffer。
● 将凝胶浸泡在含10 mmol/L EDTA的1x transfer buffer,至少20分钟,温和摇晃。更换新缓冲液,重复3次。
● 将凝胶浸泡在不含10 mmol/L EDTA的1x transfer buffer,10分钟,温和摇晃。
● 转膜操作*。
* 建议用湿法转膜,以提高转膜效率。
◆质量控制
每一批SuperSep Phos-tag?,出厂前均根据其产品规格进行测试,以保证可分离磷酸化和非磷酸化蛋白,以及他们的分离成都在正常参数内。
◆产品信息
用于Bio-Rad伯乐电泳仪
货号 | 品名 | 电泳仪 | 规格 |
198-17981 | SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 7.5%, 17well,
83×100×3.9mm |
Mini-PROTEAN?
Tetra Cell (Bio-Rad Laboratories, Inc.) |
5 块 |
195-17991 | SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 12.5%, 17well,
83×100×3.9mm |
5 块 |
用于Life Technologies电泳仪
货号 | 品名 | 电泳仪 | 规格 |
192-18001 | SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 7.5%, 17well,
100×100×6.6mm |
XCell SureLock?
Mini-Cell (Life Technologies, Inc.)
|
5 块 |
199-18011 | SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 12.5%, 17well,
100×100×6.6mm |
5 块 |
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 |
193-16711 | SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 10%, 13 well Phos-tag 13孔10%预制胶 |
5块 |
190-16721 | SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 10%, 17 well Phos-tag 17孔10%预制胶 |
5块 |
195-16391 | SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 12.5%, 13 well Phos-tag 13孔12.5%预制胶 |
5块 |
193-16571 | SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 12.5%, 17 well Phos-tag 17孔12.5%预制胶 |
5块 |
193-16691 | SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 15%, 13 well Phos-tag 13孔15%预制胶 |
5块 |
196-16701 | SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 15%, 17 well Phos-tag 17孔15%预制胶 |
5块 |
197-16851 | SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 17.5%, 13 well Phos-tag 13孔17.5%预制胶 |
5块 |
194-16861 | SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 17.5%, 17 well Phos-tag 17孔17.5%预制胶 |
5块 |
198-17981 | SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 7.5%, 17well, 83×100×3.9mm Phos-tag? 预制胶,BioRad型 |
5块 |
195-17991 | SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 12.5%, 17well, 83×100×3.9mm Phos-tag? 预制胶,BioRad型 |
5块 |
192-18001 | SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 7.5%, 17well, 100×100×6.6mm Phos-tag? 预制胶,Life Technologies型 |
5块 |
199-18011 | SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 12.5%, 17well, 100×100×6.6mm Phos-tag? 预制胶,Life Technologies型 |
5块 |
Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法
Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法
英 文 名: Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution
产 地: 日本
商 家: Wako(和光纯药工业株式会社)
wao Phos-tag™实验设计
◆ 研究领域
磷酸化蛋白和磷酸化多肽的研究
◆ Phos-tagTM 的简介
Phos-tagTM(Phosphate-binding tag)是由日本广岛大学的Kinoshita等研制的磷酸化蛋白蛋白捕获分子。Phos-tagTM 螯合Zn2+或者Mn2+等重金属离子后形成一个半封闭的空间。在pH值6~8的中性条件下,该空间恰好能容纳一个磷酸基团,使得螯合有金属离子的Phos-tagTM 分子能够与磷酸基团牢固而稳定的结合。可以特异性结合所有氨基酸的磷酸化基团,广泛运用于细菌,酵母,昆虫等物种研究。
◆ Phos-tagTM 系列产品
利用螯合有金属离子的Phos-tagTM 可以特异性结合磷酸化基团的特点,研发了Phos-tagTM 系列产品,运用于常见的蛋白实验,比如SDS-PAGE,免疫印迹,亲和层析,质谱等。
Phos-tagTM 系列产品 | 产品描述 | 用途 | 具体运用实验 |
Phos-tagTM Acrylamide | Phos-tagTM 与丙烯酰胺(Acrylamide,SDS-PAGE分离胶主要成分)结合 | 分离磷酸化和非磷酸化蛋白。SDS-PAGE分离胶制备中添加金属离子(Zn2+或者Mn2+)和Phos-tagTM Acrylamide。在蛋白电泳过程中,磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTM Acrylamide发生特异性结合,导致磷酸化蛋白的迁移速度变慢。 | SDS-PAGE(单一蛋白)
免疫印迹(多种蛋白混合液,例如细胞裂解液,组织均浆液,体外激酶反应体系。使用目的蛋白的非磷酸化抗体作为一抗) |
Phos-tagTM Biotin | Phos-tagTM 与生物素(Biotin)结合 | 可与亲和素标记的HRP结合,检测磷酸化蛋白。 | 免疫印迹(正常SDS-PAGE) |
Phos-tagTM Agarose | Phos-tagTM 与琼脂糖(Agarose)结合 | 利用磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTM Agarose特异性结合,纯化磷酸化蛋白。 | 亲和层析法 |
Phos-tagTM Mass Analytical kit | Phos-tagTM 与不同荷质比的Zn结合 | 检测微量磷酸化蛋白和磷酸化多肽。 | 质谱实验 |
备注:除Phos-tagTM Mass Analytical kit之外,其他Phos-tagTM 系列产品都需要配置金属离子溶液。
Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法!
Phos-tag™ 是一种能与磷酸离子特异性结合的功能性分子。它可用于磷酸化蛋白的分离(Phos-tag™ Acrylamide)、Western Blot检测(Phos-tag™ Biotin)、蛋白纯化 (Phos-tag™ Agarose)及质谱分析MALDI-TOF/MS (Phos-tag™ Mass Analytical Kit)。
◆Phos-tag™ 的基本结构
◆特点
与-2价磷酸根离子的亲和性和选择性高于其它阴离子
在pH 5-8的生理环境下生成稳定的复合物
◆原理
◆应用
样品类型: 纯化蛋白、组织均浆液、组织裂解液、体外酶反应液
样品来源物种: 无物种特异性,可用于人、植物(拟南芥 水稻 棉花等)、动物(斑马鱼 灵长类等)、微生物(酵母 细菌 真菌等) 昆虫(果蝇 蚕等)
分离蛋白大小: 磷酸化蛋白的分离范围在十几到220kDa,文献报道可分离350kDa的磷酸化蛋白
准备的试剂和仪器: 10mM的MnCl2溶液,固体产品需要溶解于甲醇中,其余与常规SDS-PAGE相同
各包装可做实验次数: 2mg包装20μM可制约20块胶,50μM约8块;10mg包装20μM可制100块胶,50μM约40块
凝胶染色: 考马斯亮蓝、银染、荧光染色、阴性染色
◆相关产品
产品名称 | 用 途 |
Phos-tag™ Acrylamide | 分离: SDS – PAGE 分离不同磷酸化水平的蛋白 |
SuperSep Phos-tag™ | 分离: 预制胶中含有50μM Phos-tag™ Acrylamide |
Phos-tag™ Biotin | 检测: 代替 Western Blot 检测中的磷酸化抗体 |
Phos-tag™ Agarose | 纯化: 通用柱层析,纯化磷酸化蛋白 |
Phos-tag™ Mass Analytical Kit |
分析: 用于质谱 MALDI-TOF/MS 分析,提高磷酸化分子的检测灵敏度 |
Phos-tag Acrylamide(丙烯酰胺)
产品编号 | 生产商编号 | 产品名称 | 规格 | Phos-tag在配制胶中的浓度 | ||
20μM | 50μM | 100μM | ||||
304-93526 | AAL-107S1 | Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution | 0.3mL | 约10块 | 约4块 | 约2块 |
300-93523 | AAL-107M | Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 | 2mg | 约20块 | 约8块 | 约4块 |
304-93521 | AAL-107 | Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 | 10mg | 约100块 | 约40块 | 约20块 |
SuperSep Phos-tag™ (丙烯酰胺预制胶)
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 |
193-16711 | SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 13 well Phos-tag 13孔10%预制胶 |
5块 |
190-16721 | SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 17 well Phos-tag 17孔10%预制胶 |
5块 |
195-16391 | SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 13 well Phos-tag 13孔12.5%预制胶 |
5块 |
193-16571 | SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 17 well Phos-tag 17孔12.5%预制胶 |
5块 |
193-16691 | SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 13 well Phos-tag 13孔15%预制胶 |
5块 |
196-16701 | SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 17 well Phos-tag 17孔15%预制胶 |
5块 |
197-16851 | SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 17.5%, 13 well Phos-tag 13孔17.5%预制胶 |
5块 |
194-16861 | SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 17.5%, 17 well Phos-tag 17孔17.5%预制胶 |
5块 |
198-17981 | SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 7.5%, 17well, 83×100×3.9mm Phos-tag™ 预制胶,BioRad型 |
5块 |
195-17991 | SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 12.5%, 17well, 83×100×3.9mm Phos-tag™ 预制胶,BioRad型 |
5块 |
192-18001 | SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 7.5%, 17well, 100×100×6.6mm Phos-tag™ 预制胶,Life Technologies型 |
5块 |
199-18011 | SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 12.5%, 17well, 100×100×6.6mm Phos-tag™ 预制胶,Life Technologies型 |
5块 |
Phos-tag™ Biotin(生物素)
产品编号 | 生产商编号 | 产品名称 | 规格 |
301-93531 | BTL-104 | Phos-tag™ Biotin BTL-104 | 10mg |
308-97201 | BTL-111S1 | Phos-tag Biotin BTL-111 1mM Aqueous Solution | 0.1ml |
Phos-tag™ Agarose(琼脂糖)
产品编号 | 生产商编号 | 产品名称 | 规格 |
302-93561 | AG-501 | Phos-tag™ Agarose | 0.5ml |
308-93563 | AG-503 | Phos-tag™ Agarose | 3ml |
Phos-tag™ Mass Analytical Kit(质谱分析试剂盒)
产品编号 | 生产商编号 | 产品名称 | 规格 |
305-93551 | MS-101KIT | Phos-tag™ Mass Analytical Kit | 1 set |
SuperSep Phos-tag™ 预制胶即开即用!
phos-tag™ 由日本广岛大学研究生院医齿药学综合研究科医药分子功能科学研究室开发。
SuperSep Phos-tag™ 是一种预制胶,预先加入了50 μmol/L的Phos-tag™ Acrylamide,打开包装即可直接使用。预制胶中含有锌作为金属离子,在中性凝胶缓冲液中保存稳定性很好,得到的结果条带也很整齐。
板大小 | 100 x 100 x 3 (mm) | |
凝胶大小 | 90 x 85 x 1 (mm) | |
孔数 | 13 | 17 |
孔容积 | 30 μL | 25 μL |
Phos-tag™浓度 | 50 μmol/L | |
丙烯酰胺浓度 | 10%、12.5%、15% 和17% | |
ZnCl2浓度 | 100 μmol/L |
◆优点、特色
·即开即用
·预制胶使用安全
·可长期保存(6个月)
·操作与普通SDS-PAGE一样
◆案例、应用
电泳条件:30 mA(恒电流), 60分钟
样品:5 ug/Lane α-酪蛋白(含磷酸化与去磷酸化α-酪蛋白)(产品编号038-23221)
普通SDS-PAGE只观察到一条条带,而Phos-tag™ SDS-PAGE里可见α-酪蛋白磷酸化和α-酪蛋白去磷酸化两条
条带。
样品缓冲液:Sample Buffer Solution (2ME+) (X4) (产品编号191-13272)
电泳缓冲液:SDS-PAGE 缓冲液, pH8.5(产品编号192-16801)
染色:QUICK CBB PLUS(产品编号174-00553)
P10%(左) : SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 13well
P15%(中) : SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 13well
A15%(右) : SuperSep™Ace, 15%, 13well (不含Phos-tag™)
◆相关产品
产品编号 | 产品名称 | 规 格 |
058-07681 | EasySeparator <配套电泳槽> | 1 套 |
230-02461 | Wide-View Prestained Protein Size Marker III (11~245kDa) | 500 μL (200 次) |
038-23221 | α-Casein, from Bovine Milk, Dephosphorylated | 1 mg |
◆具体实例
1. 体外激酶反应,激酶和底物都带有标签,反应后亲和层析法纯化获得激酶和底物,如何检测底物的磷酸化情况?
如果底物和激酶分子量差别大,通过正常的SDS-PAGE能够区分,建议使用Phos-tagTM Biotin。将激酶和底物进行免疫印迹实验,用Phos-tagTM Biotin作为抗体检测底物的磷酸化基团(需记录底物的条带位置)。可通过剥离(strip)方式剥离Phos-tagTM Biotin,用底物的非磷酸化抗体进一步验证其位置。
如果底物和激酶分子量差别不大,可进行Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验,然后转膜,用底物的非磷酸化抗体检测(没有使用激酶的抗体,所以检测不到激酶的带)。在Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE中磷酸化和非磷酸化底物发生分离,用底物的非磷酸化抗体可以检测所有底物。免疫印迹实验后,观察所有的条带,非磷酸化底物由于没有和Mn2+-Phos-tagTM Acrylamide结合,所以迁移速度较快,磷酸化底物则迁移速度变慢。通过迁移率的变化,分析磷酸化底物的含量。
备注:
1) Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验中,建议使用α-Casein, from Bovine Milk, Dephosphorylated(038-
23221),该产品中含有磷酸化和非磷酸化的α-Casein,确保试剂和实验条件能够分离磷酸化蛋白。
2)如果没有非磷酸化底物,可使用Alkaline Phosphatase(for Biochemistry)(018-10693)对底物进行去磷酸
化反应。
2. 如何检测EGF(表皮生长因子)刺激后细胞内MAPK的磷酸化水平?
收集EGF刺激的细胞,制备细胞裂解液作为样品。进行正常的SDS-PAGE实验和Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验,转膜后用MAPK的非磷酸化抗体作为一抗进行检测(检测所有的MAPK,包括磷酸化和非磷酸化)。正常SDS-PAGE实验中,磷酸化的MAPK和非磷酸化MAPK没有分离,而在Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验中磷酸化MAPK和非磷酸胡MAPK发生分离,所以转膜后,用MAPK抗体检测,可以看到分离的条带。比较正常的SDS-PAGE用MAPK抗体的免疫印迹实验和Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE用MAOK抗体的免疫印迹实验,多出来的条带就是磷酸化的MAPK。
备注:该实验的前提是EGF刺激后细胞内的MAPK发生磷酸化,细胞内包含磷酸化和非磷酸化的MAPK。如果刺激后细
胞内不含有磷酸化的MAPK,则无法用Phos-tagTM Acrylamide分离磷酸化和非磷酸化MAPK。
3. 研究蛋白相互作用的实验中,构建带有不同标签的2种融合蛋白,共转染细胞,在细胞内发生磷酸化反应。通过不同标
签的亲和层析柱获得纯化的蛋白,是否可用Phos-tagTM Agarose纯化,进行后续免疫共沉淀实验(Co-IP)实验?
Phos-tagTM Agarose纯化磷酸化蛋白,采用高盐的洗脱方式,没有使用界面活性剂、还原剂、酸或者碱洗脱,蛋白不发生变性,可进行后续的Co-IP实验。
4. 检测的样品中含有两种磷酸化的蛋白,分子量很接近,如何使用Phos-tagTM 产品检测磷酸化?
如果样品中两种磷酸化蛋白的分子量很接近,通过正常的SDS-PAGE实验无法区分,建议使用Phos-tagTMAcrylamide。进行Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验后用两种蛋白的非磷酸化抗体进行检测。
也可以使用Phos-tagTM Biotin。进行正常SDS-PAGE实验后,先用两种蛋白的非磷酸化抗体进行检测,剥离(strip)后用Phos-tagTM Biotin。如果磷酸化蛋白量少的 话,剥离(strip)会去除一些蛋白,可能会影响检测的效果。
5. 使用Phos-tagTM Mass Analytical kit,样品中如果含有磷酸缓冲液是否有影响?
该试剂盒检测磷酸化蛋白和多肽的灵敏度较高,样品中含有的磷酸缓冲液会影响磷酸化蛋白与Phos-tagTM 结合。