CIL品牌代理商

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1. CIL品牌介绍
美国剑桥同位素CIL是世界上第一个生产稳定性同位素标记化合物的生产商,以其领先的技术雄踞同位素分离领域。主要标记性同位素有13C、12C、D、15N、18O和17O,目前已经拥有8000多种
标记化合物。CIL的产品均能应用于不同的领域,如物理,化学,生物医学,分析,诊断研究以及环境测试。
2. CIL重点产品
稳定性同位素标记化合物
3. CIL官网
http://www.isotope.com/cil/index.cfm
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ChromaDex品牌代理商

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1. ChromaDex品牌介绍
Chromadex 公司于1999年在加拿大成立,主要生产植物化学/中草药对照品以及标准材料,是植物参考标准的创造以及植物化学物质的产品和服务的市场领导者, ChromaDex公司提供
多达3000种产品和试剂盒,满足了自然产品的参考标准品、材料、业务的需求。现在是仍然通过严谨的科学以顾客为中心发展参考标准品和业务。
Chromadex是一个生产天然产品的创新性的公司,提供专有的、科学性的溶剂和配料,它们可用于食品强化剂、食品和饮料、化妆品和制药行业。特别是,Chromadex 公司研发和销售植
物化学和植物学的参考标准品和材料。生产和销售新颖的和天然的对人类健康有积极影响的产品。凭着公司的专业的服务和严谨的科学给市场带去安全与高品质。为了满足市场对天然产品的
标准品、材料和服务不断增长的需求,Chromadex 公司在1999年应运而生。随着各种消费类产品的出现,越来越多的消费者和政府机构要求有质量保证的研究方法,
如今Chromadex公司采取以科学严谨性为支撑的消费者为中心的方式,在参考标准品这服务性行业中处于领先地位。它在市面上的专业技术赋予它独特的基础,使它可以结合科学健康的自
然力量去开发和销售天然和新颖的配料。
2. ChromaDex重点产品
植物化学/中草药对照品
3. ChromaDex官网
http://https://chromadex.com/default.aspx
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Cayman品牌代理商

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1. Cayman品牌介绍
Cayman公司成立于1980年,在过去20多年的发展过程中,始终保持着为全球科研工作者提供高质、优价研究产品的宗旨。该公司目前可以提供 2,138 多种生化和免疫试剂,涉及肿瘤、氧化
氮、神经学、凋亡、氧化性损伤、内分泌学等研究领域。非常有特色的检测试剂盒包括类花生酸类物质、游离的生物标志、环核苷、激素及氧化氮等。此外,还提供多种高质量试剂,如类花
生酸类物质、氧化氮试剂及许多相关脂质、脂肪酸、酶和抗体等。Cayman非常愿意接受各地客户的要求,合成复杂和不稳定分子。
2. Cayman重点产品
生化和免疫试剂
3. Cayman官网
http://www.caymanchem.com
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BioVendor品牌代理商

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1. BioVendor品牌介绍
BioVendor 是欧洲的一家医药科技公司,专注于为分子和细胞学实验室提供体外研究产品,主要产品有重组蛋白、抗体和 ELISA 试剂盒。目前公司致力于有关激素和细胞活素利用方面的研究
,产品相关方向:能量代谢和体重调节、骨代谢、心血管疾病和肾病、感染和发炎、铁代谢研究、肌肉生长控制、神经组织损坏标记、肿瘤学、胰腺调节分子、分泌型磷脂酶 A2等。
2. BioVendor重点产品
重组蛋白、抗体和 ELISA 试剂盒

3. BioVendor官网
http://www.biovendor.com
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Bio-rad品牌代理商–上海金畔

1. Bio-rad品牌介绍
美国伯乐BIO-RAD公司公司总部设在美国加里福尼亚州的Hercules,在全球有30多家全资子公司,服务于全球超过85,000家科研院所,生物技术和制药公司,和临床实验室。
BIO-RAD公司自1952年成立以来,在50多年中为临床诊断和生命科学研究市场提供了广泛的新型产品和服务,始终居于科学发现的中心地位。 BIO-RAD公司 现今利用多种技术制造并
生产了几千种产品,这些技术包括蛋白质组学、生物信息学、电泳、成像、免疫测定、层析、微生物学和基因转移。根据产品的不同,BIO-RAD公司公司下设三大部门,它们是生命科学部,临
床诊断部和工业材料部,产品种类达6000余种。BIO-RAD公司主要产品有蛋白组研究产品、层析仪与填料、蛋白质和核酸电泳产品、基因枪与电穿孔仪、定量基因扩增仪、图像分析系统、激光
共聚焦扫描显微镜、酶标仪和洗板机系列、食品检测仪器与试剂、糖化血红蛋白检测系列产品、质控系统、毒物检测产品、血液病毒检测产品等。
2. Bio-rad重点产品
生命科学试剂
临床诊断试剂
3. Bio-rad官网
www.bio-rad.com
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Avanti品牌代理商

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1. Avanti品牌介绍
Avanti磷脂—世界实验室磷脂知名品牌
Avanti —–优质的脂质产品 丰富的产品种类,将为您的实验保驾护航
Avanti Polar Lipids Inc.享誉全球的磷脂类和甾体类中间体和试剂生产商,在磷脂类和甾体类的研发与生产方面具有国际一流实力,它为各地的制药厂及研究机构提供1000种以上的磷脂类产品。其产品的高纯度为客户提供了有质量保证的产品,该公司能提供从毫克级到公斤级乃至吨级的磷脂类和甾体类中间体和试剂。该公司将为广大中国用户提供:齐全的品种种类、各种不同的包装规格、高品质的磷脂产品、专业的技术支持、人性化的服务。
2. Avanti重点产品
磷脂产品种类:
1   Natural Lipids——天然脂质
2   Sphingolipids   ——鞘脂类
3   Phospholipids——磷脂
4   Sterols——固醇
5   Bioactive Lipids    生物活性脂质
6   Neutral Lipids  中性脂肪
7   Detergents  去污剂 等等
8   Fluorescent Lipids  荧光脂质
9   Cationic Lipids (Transfection)  阳离子脂质
10  Coenzyme A & Derivatives    辅酶A:及衍生物
11  Fatty Acid Modified Lipids  脂肪酸改性脂质
12  Headgroup Modified Lipids   头基改性脂质
13  Stable Isotopes & ESR Probes 同位素及ESR探头
14  Polymers & Polymerizable Lipids脂类聚合物
3. Avanti官网
www.avantilipids.com
4. Avanti重点产品清单

Avanti磷脂产品种类:
1   Natural Lipids——天然脂质
2   Sphingolipids   ——鞘脂类
3   Phospholipids——磷脂
4   Sterols——固醇
5   Bioactive Lipids    生物活性脂质
6   Neutral Lipids  中性脂肪
7   Detergents  去污剂 等等
8   Fluorescent Lipids  荧光脂质
9   Cationic Lipids (Transfection)  阳离子脂质
10  Coenzyme A & Derivatives    辅酶A:及衍生物
11  Fatty Acid Modified Lipids  脂肪酸改性脂质
12  Headgroup Modified Lipids   头基改性脂质
13  Stable Isotopes & ESR Probes 同位素及ESR探头
14  Polymers & Polymerizable Lipids脂类聚合物
及设备  Mini-Extruder,Packaging Container等。
Lyso PC 溶源性卵磷脂
Lyso PA 溶源性磷脂酸
Lyso PA Analogues 溶源性磷脂酸类似物
Lyso bio-PA溶源性双磷脂酸
Lyso PE, PG & PS 溶源性脑磷脂,磷脂酰甘油和磷脂酰丝氨酸
Alkyl PC 烷基卵磷脂
Diether & Diphytanoyl ether lipids 二醚与二植烷醚脂质
PAF 血小板活化因子
Acyl PAF Analog 酰化血小板活化因子类似物
Brominated phosphocholines 溴代胆碱磷酸
Alkyl phosphate derivatives 烷基磷酸盐衍生物
Plasmalogen 缩醛磷脂
Functionalized lipids 功能性脂类
Biotinylated lipids 生物素酰化脂质
Synthetic phospholipids 合成磷酸
Avanti磷脂产品试剂报价:
该类产品的的包装从10mg-1g不等的包装,其中存在三种状态,氯仿状,乙醇状和粉末状,所以报价也各不相同,最小包装的产品报价范围是300-2000元不等。最大包装的报价范围是2000-30000元不等。具体报价需咨询上海生物科技有限公司工作人员。
Avanti磷脂品质性能参数
Avanti磷脂的保存环境是零下-20°保存,其产品的保质期各不相同有的保质期是2年有的保质期是1年还有的保质期是6个月。产品的纯度均大于99%。
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APSC品牌代理商

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1. APSC品牌介绍
APSC主要提供有机凝胶色谱标准品(Organic GPC/SEC Standards)和水性凝胶色谱标准品(Aqueous GPC/SEC Standards)两类产品。
GPC(Gel Permeation Chromatography),凝胶渗透色谱,又称为尺寸排阻色谱(Size Exclusion Chromatography,简称SEC),它是基于体积排阻的分离机理,通过具有分子筛性质的固定相,用来分离相对分子质量较小的物质,并且还可以分析分子体积不同、具有相同化学性质的高分子化合物。
GPC是一种特殊的液相色谱,所用仪器与高效液相色谱仪类似,GPC的分离是利用体积排除机理,装填的是多孔性凝胶或微粒,孔径大小与待分离的聚合物分子相似,体积大的高分子化合物不能进入凝胶孔,最先从凝胶粒间流出,淋出体积(时间)最小,高聚物依分子量从大到小依次淋出。这样,通过做已知分子量的高分子聚合物的标准曲线,就能分析同系未知待测高分子化合物了。
2. APSC重点产品
机凝胶色谱标准品(Organic GPC/SEC Standards)和水性凝胶色谱标准品(Aqueous GPC/SEC Standards)两类产品。
3. APSC官网
http://www.ampolymer.com/

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Abnova品牌代理商

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1. Abnova品牌介绍
Abnova是世界上最大的单克隆抗体生产商之一,现有抗体产品种类近10000种,其中2/3是单克隆抗体。和传统的单克隆抗体生产方法相比,Abnova采用更先进的技术和设备,可以极大地提高单克隆抗体的生产效率并降低其生产的成本。Abnova具有每个月开发500个小鼠单克隆抗体的能力,他们的目标是:人类基因组中的每一个表达基因都至少有一种抗体。
2. Abnova重点产品
单克隆抗体
3. Abnova官网
http://hamptonresearch.com/
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Abcam品牌代理商

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1. Abcam品牌介绍
Abcam 位于英国的剑桥科学园,成立于1998年,专门生产和分销研究型抗体。我们的在线目录 (www.abcam.cn) 已有超过120,000 种抗体和试剂,并不断添加,供应予全球百多个国家。Abcam 于2005年11月在伦敦证券交易所上市,在美国、日本、香港、中国均设有分公司。
2. Abcam重点产品
生产和分销研究型抗体
3. Abcam官网
www.abcom.com
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New England Biolabs(NEB)品牌代理商

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1. New England Biolabs(NEB)品牌介绍
NEB公司——三十多年的卓越品质
NEB公司成立于二十世纪七十年代中期,拥有众多经验丰富的科学家,是生产生命科学试剂的领导者。目前,NEB为基因组研究提供最齐全的重组酶和天然酶,并且公司业务范围已延伸至蛋白质组学和药品开发领域。
回顾三十余年来的历程,NEB公司作为先驱公司之一,为促进生物科技工业的发展做出了巨大的贡献。NEB美国总部乔迁新址后拥有最尖端的设备,有一座现代化的发酵中心及设备齐全的实验室,这些实验室主要用于产品生产、质量监控、产品开发和基础科研之用。作为首批以商业规模生产限制性内切酶的公司之一,NEB一直专注于内切酶的研究,并保持业内领先水平。NEB公司一贯坚持以科学为本的原则,公司生产的试剂因其高质量、高性价比享誉世界。
重组酶
NEB公司对酶的生产与其基础科研不能分开,通过对限制/修饰系统的克隆和过量表达方面的研究,使我们能够大大降低成本,改善产品质量。NEB已经成功克隆了180多种内切酶,其中大多是完全克隆,少数是部分克隆。目前,NEB可供应240多种内切酶,其中180多种可以重组酶形式提供,同时还有大量的应用途广泛的重组聚合酶和重组修饰酶。
质量与客户服务
NEB公司凭借着严格的质检程序、深入的基础科研以及不断开发的研发项目,承诺为全球科技人员提供高纯度的科研产品。直接与NEB总部联系或与NEB的国际网点联系,即可体验到NEB的个性化客户服务。公司内负责生产以及负责进行质量监控的科学家(产品负责人)也就是技术支持人员。他们为客户解答有关限制核酸内切酶、甲基化酶、以及其他DNA修饰酶、蛋白质修饰酶方面的问题。同时,公司的有机合成部门可提供linkers、引物、adaptors、探针以及寡核苷酸合成等方面的信息。研究人员也可为客户提供技术支持服务,这些研究人员在DNA测序、甲基化、克隆、过量表达、发酵、蛋白质纯化以及蛋白质分析方面都有很深造诣。
基础科研
NEB在分子生物学和寄生虫学方面的基础研究由公司内部的资深科学家负责。这些科学家在他们各自的领域都卓有成绩,经常在业内著名杂志上发表文献,指导博士后工作、为大学生提供暑期实习机会,而且经常受邀去当地学校进行演讲。NEB鼓励公司与外界合作,每周学术探讨会为其他科学家们提供了交流和展示的平台。
环保政策
NEB公司在资助科研项目时最基本原则之一就是:一切工作都应符合保护生态环境。公司产品生产、分析以及运输过程既要满足产品的稳定性,也要符合我们的环保政策。20年来,NEB公司最引人注目的一项环保政策是:回收运输泡沫盒,虽然这项工作首创于美国,但是,目前加拿大、德国以及英国的分公司也同样实施了。公司还在内部开展多方位的回收工作,经常用再生纸张印刷市场宣传资料。这些小细节不会影响产品质量,但是对环境的保护却是显而易见。
公司职责
除环保政策外,通过基金会,NEB还竭力为改善当地社区及全人类尽微薄之力。NEB基金会创立于1982年,属私人性质,其宗旨是支持发展中国家的环保、教育、健康及艺术事业。此外,NEB捐款委员会也经常向当地社区进行捐款活动。

NEB公司的国际网络
NEB的国际销售网络是通过其代理商、附属机构和子公司来实现的。所有销售网点都承诺提供高质量、高性价比以及高水准的服务。国际销售网点覆盖的国家有:阿根廷、澳大利亚、奥地利、比利时、巴西、加拿大、中国、丹麦、德国、芬兰、法国、希腊、香港、冰岛、印度、爱尔兰共和国、以色列、意大利、日本、韩国、卢森堡、马来西亚、墨西哥、荷兰、新西兰、挪威、葡萄牙、新加坡、西班牙、瑞典、瑞士、台湾、泰国、英国。没有列出国家的客户可与位于美国的NEB总部取得联系,以便获得更多信息。

2. New England Biolabs(NEB)重点产品
生产和分销研究型抗体
3. New England Biolabs(NEB)官网
http://www.neb.com
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DSS诱导小鼠实验性肠炎建模参考文献

DSS诱导小鼠实验性肠炎建模参考文献

上海金畔生物科技有限公司提供DSS诱导小鼠实验性肠炎建模参考文献
简单介绍
探讨硫酸葡聚糖钠(dextran sodium sulphate,DSS)诱导的小鼠肠炎模型病变结肠组织的谷胱甘肽(GSH)变化及其与病变组织分泌的Th1/Th2型细胞因子IFN-g,IL-4及黏膜损伤的关系

DSS诱导小鼠实验性肠炎建模参考文献  的详细介绍
DSS诱导小鼠实验性肠炎建模参考文献
GSH在DSS诱导的小鼠实验性肠炎中的作用
张  静, 韩  英, 纪  欣, 王志红, 李虹义, 郑  力
张静, 中国人民解放军总医院军医进修学院  北京市  100853
韩英, 纪欣, 王志红, 李虹义, 郑力, 北京军区总医院消化内科  北京市  100700
张静, 女, 1973-05-02生, 河北保定人, 汉族. 1997年承德医学院本科毕业, 解放军总医院军医进修学院2002级硕士研究生, 主治医师, 主要从事炎症性肠病的发病及免疫机制等方面的研究.
北京市自然科学基金资助项目, No. 7042064
通讯作者: 韩英, 100853, 北京市东城区南门仓5号, 北京军区总医院消化内科.
电话: 010-66721009
收稿日期: 2005-04-11    接受日期: 2005-04-27
Roles of Glutathione in dextran sodium sulphate-induced colitis in mice
Jing Zhang, Ying Han, Xin Ji, Zhi-Hong Wang, Hong-Yi Li, Li Zheng
Jing Zhang, Postgraduate Medical School, General Hospital of Chinese PLA, Beijing 100853, China
Ying Han, Xin Ji, Zhi-Hong Wang, Hong-Yi Li, Li Zheng, Department of Gastroenterology, General Hospital of Beijing Military Command, Beijing 100700, China
Supported by the Natural Science Foundation of Beijing, China, No.7042064
Correspondence to: Dr. Ying Han, Department of Gastroenterology, General Hospital of Beijing Military Command, 5 Nanmencang, East District, Beijing 100700, China.
Received: 2005-04-11    Accepted: 2005-04-27
Abstract
AIM: To investigate the expression of glutathione (GSH) in dextran sodium sulphate(DSS)-induced colitic mucosa and its relationship with cytokine secretion as well as mucosal injury.
METHODS: BALB/c mice in DSS group (n = 10) were fed with 50 g/L DSS to induce experimental colitis and those in normal controls (n = 10) were fed with distilled water. All the mice were killed after 7 days. The pathological changes of the colonic tissues were examined while immunohi-stochemstry was performed with GSH1 antibody to determine the GSH expression. ELISA was used to detect the expression of IL-4 and IFN-g.
RESULTS: The manifestations of acute colitis such as weight decrease, diarrhea and bloody stool appeared in mice of DSS group. focal crypt lesionsPathologically, focal crypt distortion, granulocyte and macrophage invasion were observed. The level of GSH in DSS group was significantly lower than that in control group (20.6 vs 3.14±1.0, t = 3.95, P = 0.01), whereas the expression of IL-4 was marked higher (38.7±4.7 vs 28.7±6.7, t = 3.16, P = 0.009). The content of IFN-g was decreased in DSS group (P>0.05).
CONCLUSION: Low expression of GSH is related to the increase of IL-4, decrease of IFN-g and mucosal injury in DSS-induced colitis in mice.
Key Words: Glutathione; Dextran sodium sulphate; Colitis; Mice; IL-4; IFN-g; Mucosal injury
Zhang J, Han Y, Ji X, Wang ZH, Li HY, Zheng L. Roles of Glutathione in dextran sodium sulphate-induced colitis in mice. Shijie Huaren Xiaohua Zazhi  2005;13(12):1400-1403
摘要
目的: 探讨硫酸葡聚糖钠(dextran sodium sulphate,DSS)诱导的小鼠肠炎模型病变结肠组织的谷胱甘肽(GSH)变化及其与病变组织分泌的Th1/Th2型细胞因子IFN-g,IL-4及黏膜损伤的关系.
方法: 实验组小鼠(n = 10)给予含50 g/L DSS的蒸馏水自由饮用7 d之后处死,分离出的病变结肠一部分评价其病理学改变并用GSH1抗体做免疫组化,另一部分结肠培养后检测其IL-4、IFN-g的表达.对照组小鼠(n = 10)给予蒸馏水自由饮用7 d之后处死.
结果: DSS诱导实验性肠炎小鼠口服50 g/L的DSS溶液7 d出现体重减轻、腹泻、血便等急性肠炎的表现.病理学切片HE染色发现小鼠病变结肠腺体结构紊乱,黏膜和黏膜下单核细胞和多核细胞浸润.DSS组病变肠段组织GSH表达较对照组明显减少(2±0.6 vs 3.14±1.0,t = 3.95, P = 0.01<0.05),病变结肠分泌的IL-4明显升高(38.7±4.7 vs 28.7±6.7,t = 3.16, P = 0.009<0.01), IFN-g轻度降低(P>0.05).
结论: DSS诱导的实验性肠炎小鼠病变结肠组织GSH的减少与病变结肠组织分泌的细胞因子IL-4增加、IFN-g下降以及黏膜损伤相关.
关键词: 谷胱甘肽; 硫酸葡聚糖钠; 肠炎; 小鼠; IL-4; IFN-g;黏膜损伤
张静, 韩英, 纪欣, 王志红, 李虹义, 郑力. GSH在DSS诱导的小鼠实验性肠炎中的作用. 世界华人消化杂志  2005;13(12):1400-1403
http://www.wjgnet.com/1009-3079/13/1400.asp
0  引言
炎症性肠病炎(inflammatory bowel disease,IBD)是一组病因不明的慢性肠道炎症性疾病,包括了两种独立的疾病,溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)和克罗恩病(Crohn’s disease,CD).虽然IBD的发病机制尚不清楚,目前发现其病因学机制与免疫异常、遗传影响、以及环境因素有关.近年来的研究发现,反应性氧簇(reactive oxygen species,ROS)产生过量对IBD的发展起着重要的作用.胃肠道黏膜自身有一些抗氧化防御系统,可以通过中和连续生成的ROS抵消其损害的影响.在这些防御网络中,内生硫氢基团,主要是还原型谷胱甘肽(GSH),在一些动物模型中对胃肠道黏膜细胞保护抵抗氧化应激起着重要的作用[1-2].以往对抗氧化剂作用的大量研究中,已经报道了在IBD患者和实验性肠炎中包括GSH在内的抗氧化剂水平的降低[3-4],而对于DSS诱导的实验性肠炎病变组织GSH的变化及其与黏膜损伤及细胞因子分泌的关系尚不明确,本实验将对上述问题进行研究和分析.

1  材料和方法
1.1 材料 雄性BALB/c小鼠,5-6周龄,质量18-22 g;DSS(Sodium Dextran Sulfate 5000,Wako Pure Chemical Industries Ltd.大阪,日本和光纯药工业株式会社);HBSS(Hank’s balanced salt solution,Sigma公司);无酚红、无抗生素的RPMI 1640(HyClone,公司);complete medium RPMI 1640(Cambrex公司);LPS(脂多糖,Sigma公司);DTT(1,4-Dithiothretol,二硫基苏糖醇,Sigma公司);胎牛血清FBS(中国杭州江滨生物技术有限公司);小鼠IL-4、IFN-g检测试剂盒(Sigma公司);GSH1:山羊GSH抗体(Santa Cruz公司,sc-15087);山羊SP试剂盒(北京中杉生物试剂公司).
1.2 方法 取10只BALB/c小鼠,将DSS加入蒸馏水中配成50 g/L的DSS溶液,给小鼠自由饮用7 d,8 d处死.正常对照组小鼠10只给予蒸馏水自由饮用7 d,8 d处死.各组小鼠处死后,先将整段结肠取下,测量结肠长度,肉眼观察结肠的形态,充血、溃疡、糜烂程度和范围,计算质量减少率.取充血、糜烂最明显部位的肠段(环状、片状各1块,正常组取回盲部及近肛门部组织环状、片状各1块)于中性甲醛溶液小瓶送检病理.便血评分:便血评分将取病理后的肠段纵行切开,其血性内容物用0-3+标准评价:0:无出血,1+:结肠1/3出血,2+:结肠2/3出血,3+:整个结肠均有出血.肠道标本积分:炎症细胞的渗出评分标准:0分-黏膜固有层内有极少量炎症细胞,1分-黏膜固有层内有较多的炎症细胞或黏膜固有层内的炎症细胞增多,2分-炎症细胞扩散至黏膜下层,3分-全层均有炎症细胞渗出;组织损伤评分标准:0分-没有黏膜损坏,1分-不连续的淋巴上皮损坏,2分-表层黏膜糜烂,3分-广泛的黏膜破损并向肠壁深层结构扩展[5].
1.2.1 病变组织GSH的表达 应用山羊GSH1抗对病变组织切片进行免疫组化分析,并根据阳性强度及阳性率评分的半定量标准.阳性强度评分标准:0分:(-),1分:(+),2分:(++),3分(+++).阳性率评分标准:0分:<10%,1分:10-25%,2分:26-50%,3分:>50%.总分为0-6分.
1.2.2 病变组织产生细胞因子的测定 将肠道病变组织标本置于含10 mmol/L DTT的HBSS中静置15 min,而后用RPMI1640液清洗肠段2次以除去DTT,在六孔培养板中加入含100 mL/L FBS 1 mL的RPMI1640共2 mL,置于CO2孵育箱内培养24 h,然后收集池内培养液,分装在3个eppindofe管中,-30℃冻存.应用小鼠IL-4,IFN-g检测试剂盒(ELISA法)测定IL-4,IFN-g.
统计学处理 应用STATA 7.0软件进行统计学处理,先用F检验,验证方差齐性,再进行t检验,P<0.05为差异有显著性.
2  结果
2.1 临床症状及病理学评价 BALB/c小鼠口服50 g/L的DSS溶液7 d成功诱导出急性肠炎,表现为体重减轻、腹泻、血便等.病理学切片HE染色发现小鼠左半结肠较右半结肠为重,结肠腺体结构紊乱,黏膜及黏膜下单核细胞和多核细胞浸润等.质量:DSS组小鼠体重下降而正常对照组体重增加(-0.7±0.8 g vs 2.4±0.9 g,t = -7.47,P = 0<0.001).血便:正常对照组小鼠结肠处死后结肠切开未发现血便,而DSS诱导组6只小鼠结肠发现血便(0.7±0.5 vs 0,t = 4.42,P = 0.003<0.001).结肠缩短:DSS诱导肠炎组小鼠与正常对照组小鼠比较,结肠有明显的充血,水肿,溃疡形成及长度缩短(9.2±0.6 vs 10.4±0.8,t = -3.72,P = 0.0 017 <0.01).病理评分:结肠病理切片HE染色发现,DSS诱导的实验性肠炎组小鼠的结肠局部腺体结构紊乱,黏膜及黏膜下中性粒细胞及单核细胞和多核细胞等炎性细胞浸润,黏膜局部糜烂,部分隐窝破坏,而对照组小鼠未发现上述变化(3.0±0.5 vs 0.4±0.7,t = -8.18,P = 0<0.001,图1).
2.2 小鼠结肠病变组织GSH表达 应用山羊GSH1抗对病变组织切片进行免疫组化分析,发现GSH主要表达在黏膜表面及腺体细胞的胞质内.通过半定量标准评分,发现DSS诱导实验性肠炎小鼠的病变肠段组织GSH表达明显低于对照组 (2±0.6 vs 3.14±1.0,t = 3.95,P = 0.01<0.05,图2).
2.3 小鼠病变结肠分泌的IFN-g及IL-4 DSS组病变肠段分泌的Th2细胞因子IL-4 显著高于对照组(38.7±4.7 vs 28.7±6.7,t = 3.16,P = 0.009<0.05);DSS组病变肠段分泌的Th1细胞因子IFN-g较对照组减少但差别无显著性(20.6±7.4 vs 23.2±5.6,t = -0.70,P = 0.50>0.05).由于DSS组IL-4显著升高,同时IFN-g下降,致IL-4/IFN-g升高,显著高于对照组(1.88,1.24).

图1  对照组和实验组小鼠结肠组织的病理变化(HE×200). A: 对照组; B: 实验组.
图2  对照组和实验组小鼠结肠组织GSH的表达(×100). A: 对照组; B: 实验组.

3  讨论
DSS诱导的BALB/c小鼠急性实验性肠炎模型表现为体重减轻,腹泻,血便等.病理学检查发现小鼠左半结肠病变较右半结肠为重,结肠黏膜腺体结构紊乱,单核细胞和多核细胞浸润,黏膜局部糜烂,部分隐窝破坏等[6-7].IBD患者的胃肠道炎症中渗透的大量炎症细胞包括巨噬细胞和中性粒细胞等通过产生反应性氧簇(reactive oxygen species,ROS)而将炎症肠道暴露于氧化应激中.而胃肠道黏膜自身有一些抗氧化防御系统,可以通过中和连续生成的ROS抵消其损害的影响.在这些防御网络中,内生硫氢基团,主要是还原型谷胱甘肽(GSH)起着重要的作用.GSH是一种包含一个巯基的非蛋白三肽,GSH大量存在于各种不同细胞中在多种生化过程中起着重要的作用.GSH构成细胞防御氧化损伤机制中的第一道防线,而且是普遍存在的细胞类型中的主要氧化还原缓冲剂.在其众多功能中,其含半胱氨酸的三肽可以减轻蛋白质的二硫化,减轻自由基和内毒素的毒性作用,并维持细胞内氧化还原的平衡[8].Sido et al[4]的研究发现与健康对照组比较IBD患者半胱氨酸浓度明显减少,其减低水平与疾病临床活动指数相关,去蛋白血浆中总的巯基成分均明显减少,术后3 mo恢复到正常水平.Zea-Iriarte et al[9]发现在TNS(三硝基苯硫酸,trinitrobenzene sulphonic acid)诱导的实验性肠炎中,GSH浓度及谷胱甘肽硫基转移酶,Cu,Zn超氧化物歧化酶均减低,但是谷胱甘肽过氧化物酶却增加.我们的实验研究发现 DSS组病变肠段组织GSH表达明显低于对照组 (2±0.6 vs 3.14±1.0,t = 3.95,P = 0.01<0.05),与文献报告相似,说明GSH不足与IBD和实验性肠炎的炎症相关,削弱黏膜的抗氧化能力可能会促进肠道的氧化损伤.
Th1和Th2细胞因子反应类型对于小鼠炎症和感染的慢性化和侵袭性可产生影响,是慢性肠道炎症重要的决定因素.Th1/Th2型反应平衡是由分泌细胞因子的类型决定的.Th1型是以通过伴随抗原提呈细胞(APC)生成的IL-12而产生IFN-g为特征.Th2型则是以低IFN-g/高IL-4和低IFN-g/高IL-10为特征[10].本实验中DSS诱导的实验性肠炎小鼠病变肠段分泌的IL-4明显增加,IFN-g下降,致IL-4/IFN-g显著升高,说明DSS诱导的急性实验性肠炎是以Th2型免疫反应为主的炎性改变.Peterson et al[11]和Murata et al[12]曾报道鼠的抗原提呈细胞(APC)或腹腔定居的巨噬细胞中GSH的损耗可使IL-12的分泌减少并导致典型的Th1细胞因子形式向Th2反应模式转化.Peterson et al[11]的研究还显示应用GSH损耗或补充药物时巨噬细胞内GSH的水平可以影响Th1/Th2细胞因子的倾向.且将来源于GSH损耗小鼠的T细胞与未处理的BALB/C鼠的巨噬细胞一起培养可产生正常量的IFN-g,因此IFN-g产量减少是由于巨噬细胞而不是T细胞中GSH损耗造成的.另外Jeannin et al[13]在研究易于产生IL-4的培养细胞系统中发现在培养液中增加GSH的水平可使IL-4的产量以量效依赖的方式减低.这些研究结果充分表明巨噬细胞内的GSH水平对于调节在免疫反应中向Th1或Th2细胞因子反应的发展趋势具有重要的作用.
总之,本研究结果显示DSS诱导的急性实验性肠炎小鼠病变结肠的组织GSH的减少与病变结肠组织分泌的细胞因子IL-4增加、IFN-g减低及结肠黏膜损伤有相关性,但是其机理不明.GSH的表达有可能影响不同类型炎性细胞因子的分泌进而影响黏膜组织的损伤.同时提示肠道黏膜免疫异常在IBD发病机制中的作用不容忽视,特别是巨噬细胞中的GSH的变化是否与黏膜炎症损伤及Th1/Th2细胞因子分泌的相关性有待于探讨.

4    参考文献
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