WAKO品牌代理商

WAKO品牌代理商–上海金畔

1. WAKO品牌介绍
Wako日本和光纯药工业株式会社是全球第一流的试剂制造厂商,成立八十多年一直致力于高质量的试剂及药业的生产与开发,所生产的各类产品均获得 ISO9002 认可。试剂涵盖了全面的生
物化学、分析化学、有机化学、环境分析、食品·医药品分析、高纯度及认证标准品等多类,超过六万种试剂。
日本和光纯药工业株式会社(WAKO)生产的各种试剂,主要包括以下几大类:
一、生物化学试剂 1 遗传因子 2 免疫研究试剂 3 血凝、纤溶试剂 4 组织化学研究试剂 5 酶、蛋白质、肽 6 脂类 7 二十碳醇类 8 类固醇、甾体、激素 9 单糖、寡糖、多糖、环化糊精类
10 神经作用物质 11 生理作用物质 12 毒素 13 抗生素、抑制剂 14 膜蛋白分析试剂 15 缓冲剂(good`s buffers) 16 细胞研究试剂 17 细胞培养试剂(1)动物组织培养试剂(2)植物组
织培养试剂(3)微生物培养试剂 18 氨基酸分析试剂 19 电泳试剂 20 其它生化试剂
二、分析试剂 1 层析试剂(1)高效液相色谱试剂(2)萃取试剂(3)柱层析试剂(4)薄层层析试剂(5)气相色谱试剂 2 原子吸收分析试剂 3 吸光分析试剂 4 紫外分析试剂 5 红外分析
试剂 6 化学发光分析试剂 7 荧光分析试剂 8 LC/MS试剂 9 NMR 试剂 10 ESR 试剂 11 辐射测定试剂 12 元素分析试剂 13 滴定用试剂 14 指示剂 15 标准缓冲液 16 PH 标准试剂 17 电极
试剂 18 容量分析试剂 19 精密分析试剂 20 超微量分析试剂 21 高纯试剂
三、环境分析用试剂 1 环境激素分析试剂 2 农药残留检测试剂 3 二恶英测定试剂 4 水质分析试剂 5 大气污染物质测定试剂 6 食品、药品分析试剂 7 LAL test 仪器、试剂 8 变异原(突
变诱导)检测试剂 9 细胞繁殖、毒性研究试剂 10 家庭用品安全检测试剂 11 合成洗涤剂检测试剂(衣料用) 12 石油及制品检测试剂
四、合成用试剂 1 核酸合成试剂 2 多肽合成试剂 3 有机合成溶剂 4 Grignard 格氏反应试剂 5 氨基化试剂 6 重氮烷基化试剂 7 卤化试剂 8 金属触媒 9 光学活性物质 10 光学拆分试剂
11 半合成催化剂 12 绿色化学关联试剂(微胶囊化催化剂、树脂基质两性分子磷化钯催化剂)
五、材料研究用试剂 1 高纯度化合物 2 功能性新材料
六、实验室用清洗剂 1 实验室用洗涤剂 2 其它洗涤剂
七、临床诊断试剂

2. WAKO重点产品
试剂涵盖了全面的生物化学、分析化学、有机化学、环境分析、食品·医药品分析、高纯度及认证标准品等多类,超过六万种试剂。
3. WAKO官网
http://www.wako-chem.co.jp
4. 金畔生物代理WAKO品牌联系方式
上海金畔生物科技有限公司
地 址: 上海市浦东新区东靖路699弄36栋701室
邮 编: 201208
qq: 2743691513
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DNPH吸附柱和HPLC分离柱及相应的洗脱液

上海金畔生物科技有限公司提供DNPH吸附柱和HPLC分离柱及相应的洗脱液

简单介绍

空气中的醛酮类物质是人们非常关注的一类污染物,其来源有两方面,一是来自于汽车尾气、化工行业、木材加工防腐以及吸烟直接产生醛酮类等物质(原生来源);另一个主要来源是大气中的有机物经光化学反应所产生(次生来源)。

DNPH管的详细介绍

空气中的醛酮类物质是人们非常关注的一类污染物,其来源有两方面,一是来自于汽车尾气、化工行业、木材加工防腐以及吸烟直接产生醛酮类等物质(原生来源);另一个主要来源是大气中的有机物经光化学反应所产生(次生来源)。

目前,对大气中醛酮类物质的测定方法很多,色谱法尤其是液相色谱HPLC法由于分离效果好,是主要分析方法。最灵敏且专属性好的分析方法是:在酸性溶液中,醛酮类物质与涂渍于硅胶上的2,4-二硝基苯肼(DNPH)反应,生成DNPH衍生产物苯腙,用专用洗脱液洗涤后HPLC进行分离。

金畔生物推出一些列基于上述原理的DNPH吸附柱和HPLC分离柱及相应的洗脱液。

采样时将DNPH硅胶吸附管与一真空泵连接,使大气通过一含碘化钾的萃取柱,用以消除空气中臭氧O3对测定的干扰(空气中大量O3可与DNPH作用),除去O3的空气进入表面涂布DNPH的硅胶吸附管(Presep-C DNPH以及Presep-C DNPH(Short)),其中的醛酮类物质即可与吸附管上的DNPH发生衍生反应生成苯腙衍生物而停留于吸附管上。此后,用洗脱液将衍生物洗脱下来,再用HPLC对之进行分离分析。与传统方法相比,此方法使用安全方便,节省溶剂,重现性好,检测限低。

产品: 货号 品名 规格 用途/备注   ① 醛酮采样DNPH衍生化预处理柱

291-43951 Presep-C DNPH(Short) 20个 适合车内,室内采样

290-34251 Presep-C DNPH        20个 适合大气采样

293-40351 PRESEP(R)-C Ozone Scrubber 20个 消除样本中臭氧预处理小柱  ② 醛酮分析专用HPLC柱

238-59411 Wakopak Wakosil DNPH 4.6*250MM (D) 1个 DuPont接头,Waters接头,能够分离DNPH-正丁醛和DNPH-异丁醛

234-59413 Wakopak Wakosil DNPH 4.6*250MM (W) 1个

231-61731 Wakopak Wakosil DNPH-II 4.6*150MM (D) 1个 根据美国EPA规定制成,不能分离DNPH-正丁醛和DNPH-异丁醛

237-61733 Wakopak Wakosil DNPH-II 4.6*150MM (W) 1个  ③ 专用洗脱液

233-01611 Wakosil DNPH Eluent A 1L  230-01621 Wakosil DNPH Eluent B 1L

236-02181 Wakosil DNPH-II Eluent A 1L

233-02191 Wakosil DNPH-II Eluent B 1L

017-17743 Acetonitrile 100ml 醛类分析用

017-17743 200ml   ④ 混标

018-18231 16 Aldehydes-DNPH Mixture Standard Solution 1 mL*5 16种,每种10ug醛酮/ml乙腈

012-15451 6 Aldehydes-DNPH Mixture Standard Solution 2mL*5 6种,每种0.1ug醛酮/uL乙腈

018-17491 2 Aldehydes-DNPH Mixture Standard Solution 2mL*5 2种,每种0.1ug醛酮/uL乙酸乙酯

012-17391 2 Aldehydes-DNPH Mixed Standard Solution 2mL*5 2种,甲醛-DNPH,乙醛-DNPH,每种0.1ug醛酮/uL乙腈

062-03481 Formaldehyde 2,4-Dinitrophenyl 2mL*5 甲醛4010ug /ml溶于乙腈

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T细胞尼龙毛柱分离法

上海金畔生物科技有限公司提供T细胞尼龙毛柱

简单介绍

在研究体内及体外的免疫系统时,分离淋巴细胞群是一个关键步骤。因为现在市场上并没有针对B细胞的特异性抗血清,所以分离淋巴细胞中的T细胞并不是十分方便。T细胞尼龙毛分离法利用

了尼龙毛对B细胞的亲和力,从而使T细胞在没有严重损伤的情况下达到的足够的纯度。

 

T细胞尼龙毛柱分离法的详细介绍
T细胞尼龙毛柱分离法

在研究体内及体外的免疫系统时,分离淋巴细胞群是一个关键步骤。因为现在市场上并没有针对B细胞的特异性抗血清,所以分离淋巴细胞中的T细胞并不是十分方便。T细胞尼龙毛分离法利用

了尼龙毛对B细胞的亲和力,从而使T细胞在没有严重损伤的情况下达到的足够的纯度。因为这个方法不像流式和磁珠费用昂贵,而且操作简便,所需要的条件也不高,是一种非常实用的方法

(在此我向各位解释一下,现在分离T细胞的方法主要是三种,流式,磁珠法,尼龙毛法。与前两种方法相比,尼龙毛法的优势在于无需特定的设备仪器,一般的实验室均有条件操作;价格相

对低廉;可以进行大量样本操作。)

首先要指出的是实验中所使用的是分离T细胞专用的尼龙毛(Nylon Fiber),不是化工上的尼龙纤维,曾经有人问过我这种问题,如果你买错了,可是做不出来的!其次,现在市面上的尼龙毛

也是良隽不齐,也有同仁反应买到的尼龙毛加入缓冲液以后成了一团糨糊,根本没法使用,这个问题就要靠各位的慧眼了。

现在市面上有尼龙毛填料,也已经有了商品化的尼龙毛柱子,这两者的区别主要是以下两点:

1.       商品化的柱子的填料量是已经定好的,有一个确定的上样量范围。而自己买填料装柱可以控制填料量,也就是可以控制上样量,这对于样本量非常少,或是样本量非常大的实验需求

非常合适。

2.       商品化的柱子已经经过了无菌处理(一般是辐射灭菌),而自己装柱当然就要自己灭菌了。

3.       商品化的柱子在实验的重复性上有着绝对的优势。自己装的柱子在填料的处理和装柱的松紧等方面不容易控制,差异性的控制就看你的实验技巧了。

操作方法:

1.秤取1.5g尼龙毛装入20-30ml玻璃或一次性注射器内(要可以灭菌的),填料的体积控制在15毫升左右(注射器上有标记,所以还是比较好控制的),因为尼龙毛的松紧关系到T细胞的回收率,

所以要特别注意。注射器下端配接5厘米左右长的带有弹簧夹的橡皮管。

2. 加入大量的PBS平衡柱子后,用铝箔包裹,并置于适当的容器内,高压灭菌15分钟。
(商品化尼龙毛柱以上步骤可以省略,经过无菌PBS平衡后直接进行下列步骤。)

3. 灭菌的尼龙毛柱垂直固定后放于超净台内,顶部以铝箔覆盖,避免污染。

4. 橡皮管,弹簧夹用无水酒精消毒后接注射器下端,打开弹簧夹调节流速在大约3-4ml/min。

5.首先,加入3-4倍柱体的无血培养基平衡;随后,之后加入相同体积的含有血清的培养基平衡(上述培养基都要预热),最后等培养基页面接近柱填料页面时,关闭弹簧夹。

6. 样本细胞悬浮液浓度控制在5×108cells/ml的,上样量一般是1/3-1/5柱体积(商品化的柱子一般都有推荐上样量)。样品加入之后,再加入少量培养液,然后关闭弹簧夹。

7. 柱上覆盖铝箔,移置于消毒过的容器中,37℃孵育1小时。此过程中柱子必须要保持垂直状态。

8. 从培养箱中拿出柱子,置于超净台内,除去铝箔。接上按照4.中的方法消毒的弹簧夹和橡皮管,加入适当体积经37℃预热的培养基,打开弹簧夹控制流速在3-4 mL/min,流出约5ml之后,

流出的培养液基变得不透明,此时其中含有T细胞,收集这一部分培养基。
9. 基本上何时结束收集取决于流出液体中细胞的浓度,实际上,收集的量达到一个柱体积时就可以停止收集,因为即使收集更多的量,回收率几乎不会增加。

10 。参考数据:

样本:小鼠脾脏(T细胞含量在30-40%,B细胞含量在55-60%)

细胞回收率:13-25%

B细胞污染率:小于15%

 

样本:大鼠脾脏(T细胞含量在30-35%,B细胞含量在55-65%)

细胞回收率:大于25%

B细胞污染率:小于15%

 

样本:人或兔外周血

细胞回收率 : 20-30% (人);25-35% (兔)

B细胞污染率:小于5% (人、兔)

 

(注)收集粘附于尼龙毛上的细胞时,将T细胞收集完毕后的尼龙毛在无菌操作的状态下取出,转移到适当的容器中,用镊子小心的将尼龙毛松开,粘附的细胞可以洗到培养基中。或者将注射

器芯插入注射器内,通过压力使的粘附的细胞随着液体流出。

 

产品信息

品牌     品名                   规格

Wako  T细胞尼龙毛柱          0.5g*10  (推荐用于小鼠脾脏)

Wako  T细胞尼龙毛柱L型      1g*10   (推荐用于大鼠脾脏、人或兔子的外周血)

Wako  T细胞尼龙毛            2g*5   (可按照自己的需要装柱,控制上样量)

Wako  小鼠淋巴细胞分离试剂  30mL*5  用于从小鼠脾脏,淋巴结,淋巴结悬浮液中分离淋巴细胞

Wako  人淋巴细胞分离试剂  100ml*6  用于从人血中提取淋巴细胞

Wako  铁粉(羰基铁)Iron Powder, from Iron Carbonyl  25g   直径25um,用于清除巨噬细胞

Wako  κ-卡拉胶κ-Carrageenan  25g

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疫苗灭活剂——β-丙内酯热卖中

上海金畔生物科技有限公司提供疫苗灭活剂——β-丙内酯热卖中

β-丙内酯(β-propionolactone,BPL) 是杂环类化合物(C 3H 4O 2),沸点162℃,常温下是无色粘稠状液体,对病毒具有很强的灭活作用。β-丙内酯作用于病原体DNA或RNA,改变病毒核酸结构达到灭活目的,而不直接作用于蛋白。从1984年作为狂犬疫苗的灭活剂以来,已被广泛应用于多种动物疫苗的生产,包括甲型肝炎病毒、狂犬病病毒、家禽流行性感冒病毒等。β-丙内酯作为理想的灭活剂有以下突出优点:

  1. 易水解、无残留,水解产品无危害;
  2. 直接作用于病毒或病原物核酸,保持免疫原性,强灭活效果;
  3. 灭活时间短,缩短了疫苗生产周期。

β-丙内酯和甲醛作为疫苗灭活剂的比较如下:

  β-丙内酯 甲醛
灭活对象 作用于病原体DNA或RNA,改变病毒核酸结构达到灭活目的,而不直接作用于蛋白,保持免疫原性 对病毒核酸和病毒蛋白质都有破坏作用,作用于病毒含氨基的核苷酸碱基(如A,G,U)
灭活时间 灭活时间短,从而显著地缩短了疫苗生产周期,提高了经济效益 灭活时间长,一般需要在37-39℃处理24h以上或更长时间
灭活效果影响 保存时间过长引起自身聚合 易受温度、pH、浓度、是否存在有机物、病原体的种类和含氮量等因素影响
灭活残留 水解产物对机体无毒无害,不必考虑在成品疫苗中的残留 残留的游离甲醛随疫苗注入机体后会产生制激性反应

  产品信息:

基本信息:
名称:beta-Propiolactone
CAS.NO.: 57-57-8
分子式:C 3H 4O 2
分子量:72.06

质量标准:
外观:Colorless – nearly colorless, clear liquid
纯度:95.0+% (毛细管气相色谱)
密度:1.146〜1.153g/ml (20℃)
屈折率:1.410~1.415(20℃/D)

产品编号 产品名称 规格
168-21011 β-Propiolactone 5 mL
166-21012 25 mL

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硫酸葡聚糖191-08365 SODIUM DEXTRAN SULFATE 5000 500G Wako 

硫酸葡聚糖系列 Dextran Sulfate

上海金畔生物科技有限公司提供硫酸葡聚糖系列 Dextran Sulfate 191-08365 SODIUM DEXTRAN SULFATE 5000 500G Wako 

硫酸葡聚糖10,000       Dextran Sulfate  50 g/580RMB            
描述:Ultra Pure Grade, >99.0% 1Kg 询价

硫酸葡聚糖40,000       Dextran Sulfate  100 g/500g          
描述:Ultra Pure Grade 

硫酸葡聚糖5000       Dextran Sulfate  50 g/580RMB      
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硫酸葡聚糖500,000       Dextran Sulfate  50 g/580RMB     
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198-13405-500      SODIUM DEXTRAN SULFATE 5000        500G      Wako      13440RMB 
196-13401-100      SODIUM DEXTRAN SULFATE 5000             100G      Wako      3128RMB     
194-13402-25      SODIUM DEXTRAN SULFATE 5000               25G      Wako      1360RMB     

for Biochemistry 
199-08361      SODIUM DEXTRAN SULFATE 5000      100G      Wako      2856RMB 
197-08362      SODIUM DEXTRAN SULFATE 5000      25G      Wako      1224RMB     
191-08365      SODIUM DEXTRAN SULFATE 5000      500G      Wako      12800RMB         

199-09983      SODIUM DEXTRAN SULFATE 500,000       50G      Wako      2040RMB 
197-09984      SODIUM DEXTRAN SULFATE 500,000       100G      Wako      3536RMB     
193-09981      SODIUM DEXTRAN SULFATE 500,000       10G      Wako      571.2RMB     

以下为聚合物标准品
硫酸葡聚糖 500,000       Dextran sulfate 500,000  500mg    
硫酸葡聚糖 50,000       Dextran Sulfate 50,000      500mg      
硫酸葡聚糖 40,000       Dextran Sulfate 40,000      500mg      
硫酸葡聚糖 10,000       Dextran Sulfate 10,000      500mg      
硫酸葡聚糖 5,000       Dextran Sulfate 5,000      500mg          
硫酸葡聚糖 3,000       Dextran Sulfate 3,000      500mg
硫酸葡聚糖 2,000       Dextran Sulfate 2,000      500mg     

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WAKO LabAssay™ Uric Acid 尿酸定量检测试剂盒

上海金畔生物科技有限公司提供 WAKO LabAssay™ Uric Acid  尿酸定量检测试剂盒

WAKO LabAssay™ Uric Acid  尿酸定量检测试剂盒

可用于人,大鼠以及小鼠血清样本的检测

(本试剂盒仅为研究试剂,不可用于诊断或做其他用途。)

LabAssay™ Uric Acid  尿酸定量检测试剂盒

【摘要】

尿酸是嘌呤衍生物的代谢产物,血清中的尿酸是核蛋白的分解产物和食物性物质,核蛋白代谢异常和肾脏机能障碍与尿酸量的变化存在联系。本品是利用尿酸酶与N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-甲基苯胺钠(TOOS),进行酶促反应生成青紫色色素,根据生成物质的吸光值检测血清中、尿中的尿酸量的试剂盒。与微孔板配套使用,可进行多样品检测。

【检测原理】

尿酸酶氧化样品中的尿酸,产生过氧化氢。生成的过氧化氢,在过氧化物酶的作用下,与N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-甲基苯胺钠(TOOS) 及4-氨基安替比林定量氧化缩合,产生青紫色色素。测量这个青紫色色素的吸光值,计算出样品的尿酸浓度。

 

292-64001 LabAssay TM尿酸 [尿酸酶、TOOS法]

与微孔板配套使用,可用于小鼠血清中尿酸的检测。

【特点】

蒸馏水作为样品时,吸光值为0.15以下。

测量已知浓度的血清时,结果在已知浓度的±15%以内。

【试剂盒组成】

缓冲液————————100ml×4瓶(磷酸缓冲液(pH6.4),TOOS)

显色剂————————100ml用×4瓶

(溶解时:尿酸酶,过氧化物酶,4-氨基安替比林,脂蛋白脂肪酶,抗坏血酸氧化酶)

尿酸标准液——————–10ml×1瓶

【试剂的配制】

显色剂:将1瓶显色剂(100mL用)溶解于1瓶缓冲液(100mL)中。

配制后,2~10℃保存,可保存3星期。

【标准操作法】

向微孔板内添加5μl样品和300μl显色剂,充分混合,37℃孵育5分钟。以此作为空白对照值,测量样品及标准液的吸光值。

【检测波长】

主波长555nm(副波长700nm)

【性能】

蒸馏水测量时的吸光值<0.15。

特定浓度标准液(尿酸10mg/dL)测量时的吸光值为0.04~0.26。

 

相关产品:

产品货号 名称 包装
292-63901 LabAssay™ A/G(白蛋白与球蛋白比值检测试剂盒) 1000次
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292-64001 LabAssay™ Uric Acid(尿酸定量检测试剂盒) 1300次

 

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WAKO LabAssay™ Cholestero 胆固醇定量检测试剂盒

上海金畔生物科技有限公司提供WAKO LabAssay™ Cholestero  胆固醇定量检测试剂盒

WAKO LabAssay™ Cholestero  胆固醇定量检测试剂盒

可用于人,大鼠以及小鼠血清样本的检测

(本试剂盒仅为研究试剂,不可用于诊断或做其他用途。)

LabAssay™ Cholestero  胆固醇定量检测试剂盒

【摘要】

胆固醇是生物细胞膜的主要成分,是众多动物合成甾族化合物的前体物质。

本品是利用N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠(DAOS),通过酶浅蓝色显色反应,检测血清等样品中胆固醇量的试剂盒。与微孔板配套使用,可进行多样品检测。

【检测原理】

样品中的胆固醇酯类在胆固醇酯酶作用下,被分解为游离胆固醇和脂肪酸。在这里生成的游离胆固醇与既存的游离胆固醇类一起被胆固醇氧化酶氧化,产生过氧化氢。生成的过氧化氢,在过氧化物酶作用下,与N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠(DAOS) 及4-氨基安替比林定量氧化缩合,产生浅蓝色色素。测量这个浅蓝色色素的吸光值,即可计算出样品中的胆固醇浓度。

294-65801 LabAssay TM胆固醇 [胆固醇氧化酶、DAOS法]

【试剂盒组成】

缓冲液—————————–150ml×2瓶(MES缓冲液)

显色剂—————————–150ml×2(溶解时:胆固醇酯酶,胆固醇氧化酶,过氧化物酶,DAOS,4-氨基安替比林,抗坏血酸氧化酶)

标准液—————————–10ml×1瓶

【性能】

灵敏度

蒸馏水作为样品时,吸光值在0.11以下。

特定浓度的标准液(200mg/dl) 作为样品时,吸光值为0.13~0.65。

特异性
可检测1,000mg/dl的总胆固醇浓度。

【检测波长】

主波长:600nm, 副波长:700nm

【试剂的配制】

显色剂:将1瓶显色剂(150mL用)溶解于1瓶缓冲液(150mL)中。

配制后,以2~10℃保存,可保存3星期。

【标准操作法】

向微孔板内添加2μl样品和300μl显色剂,充分混合,在37℃孵育5分钟。以此作为对照空白值,测量样品及标准液的吸光值。

 

产品货号 名称 包装
292-63901 LabAssay™ A/G(白蛋白与球蛋白比值检测试剂盒) 1000次
290-65901 LabAssay™ Creatinine(肌氨酸酐定量检测试剂盒) 500次
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WAKO LabAssay™ ALP Alkaline Phosphatase Assay Kit

上海金畔生物科技有限公司提供WAKO LabAssay™ ALP Alkaline Phosphatase Assay Kit

WAKO LabAssay™ ALP Alkaline Phosphatase Assay Kit

碱性磷酸酶定量检测试剂盒

可用于人,大鼠以及小鼠血清样本的检测

(本试剂盒仅为研究试剂,不可用于诊断或做其他用途。)

LabAssay™ ALP Alkaline Phosphatase Assay Kit 碱性磷酸酶定量检测试剂盒

【摘要】

碱性磷酸酶的活性检测试剂盒。常用于检测培养的成骨细胞、实验动物血清和骨组织中的碱性磷酸酶活性。

碱性磷酸酶(ALP)广泛分布于肝脏、骨、小肠之中。特别在骨代谢研究领域方面被用作为骨形成指标之一。本品是用p–硝基苯磷酸作为底物的碱性磷酸酶检测试剂盒,利用微孔板,可进行多种样品的检测。

【检测原理】

样品在含有p-硝基苯磷酸的碳酸盐缓冲液(pH9.8)中反应,在样品中的碱性磷酸酶作用下,p-硝基苯磷酸分解为p-硝基酚和磷酸。生成的p-硝基酚为碱性,呈黄色。根据测量其405nm的吸光值,计算出样品中碱性磷酸酶的活性。

 

291-58601 LabAssay TM ALP  [p-硝基苯磷酸基质法]

【性能】

检测范围:>0.06 mmol/L

标准曲线范围:0~0.5 mmol/L

再现性:CV<10%

【试剂盒组成】

底物————————-20片(溶解时:p-硝基苯磷酸二钠 6.7mmol/L)

底物溶解液——————-100ml×1瓶(2.0mmol/L氯化镁含有0.1mol/L碳酸盐缓冲液pH9.8)

反应终止液——————-100ml×1瓶(0.2mol/L氢氧化钠溶液)

标准液———————–10ml×1瓶(0.5mmol/L p-硝基酚溶液)

【试剂的配制】

底物缓冲液:1片底物溶解于5mL底物溶解液中。

反应终止液:直接使用。

系列稀释标准液:将标准液用蒸馏水依次稀释为0.5、0.25、0.125、0.0625 mmol/L等2倍率稀释液系列。

【标准操作法】

向96孔微孔板内添加100μl底物缓冲液和20μl样品,在微孔板震荡器上充分振荡1分钟后,37℃孵育15分钟。

添加80μl反应终止液,在微孔板震荡器上充分振荡1分钟后,用酶标仪测量405nm处的吸光值。同样方法进行空白(蒸馏水)对照和标准品的检测。

【活性单位的定义】

在pH9.8,37℃情况下,1分钟内生成1nmol p-硝基酚所需的酶的活性为1个活力单位(U)。

活性(U/μl)= C/15 ×a

C:由标准曲线得到的OD值(A实验值减去A空白值),计算p-硝基酚浓度(mmol/L=nmol/μl)

15:反应时间(min.)

a:样品的稀释倍数
当样品为成骨细胞时,使用本试剂盒前样本需要预处理

在48孔板上进行细胞培养后,除去培养基,用PBS冲洗感光板,各孔添加150μl 0.05%的曲拉通X,进行冻结→融化→冻结→融化操作。4℃,15,000rpm离心15分钟处理,将上清液移到新的辅助管,以此作为样品。

(注1)48孔板:培养时,一般不采用96孔板,多使用48孔板。

(注2) 曲拉通X的作用:溶解细胞膜,回收蛋白(细胞内含有ALP蛋白)的试剂。

(注3) 反复的冻结融化:原理不明,但这样做似乎可以提高ALP活性。

(注4) 也有不使用曲拉通X,用超声波降解法(超声波处理)对细胞造成物理性休克得到溶解产物的方法。

(注5) 曲拉通X的添加量:以150μL为例,孔中细胞约为20,000cell。

 

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WAKO LabAssay LabAssay™ NEFA 游离脂肪酸定量检测试剂盒

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WAKO LabAssay LabAssay™ NEFA 游离脂肪酸定量检测试剂盒

可用于人,大鼠以及小鼠血清样本的检测

(本试剂盒仅为研究试剂,不可用于诊断或做其他用途。)

 

LabAssay™ NEFA 游离脂肪酸定量检测试剂盒

【摘要】

游离脂肪酸(NEFA)是脂肪细胞中的中性脂肪被分解后由血中被释放出来的物质,在血清中与白蛋白结合,被末梢组织搬运,成为末梢组织重要的能源来源。

检测游离脂肪酸的量,可用于调节由脂肪组织释放到肝脏的物质,有利于掌握类脂化合物代谢的动态。

【检测原理】

样品中的游离脂肪酸(NEFA)在辅酶A与(CoA)腺嘌呤核苷-5′-三磷酸二钠(ATP)的存在下,受酰基-CoA合成酶(ACS)作用,生成酰基-CoA、AMP及焦磷酸(PPi)。生成的酰基-CoA在酰基-CoA氧化酶(ACOD)的作用下被氧化,同时生成2,3-反式-烯酰-CoA及过氧化氢。生成的过氧化氢在过氧化物酶(POD)的作用下,与3-甲基-N-乙基-N- (β-羟乙基甲基)-苯胺(MEHA)及4-氨基安替比林发生定量性氧化缩合,生成青紫色色素。测量这个青紫色色素吸光值,即可计算出样品中的NEFA浓度。

【特点】

以实验动物为对象的生物化学检测试剂

用微孔板检测,可用少量样品一次检测多个样品
294-63601 LabAssay TM NEFA [ACS・ACOD法]

在血中游离脂肪酸(NEFA:Non-Esterified Fatty Acid),与白蛋白结合,被末梢组织搬运,成为末梢组织重要的能源来源。游离脂肪酸的浓度,可用于调节由脂肪组织释放到肝脏的物质,在末梢组织中的消耗。

本品可根据测量氧化缩合生成的青紫色色素的吸光值,检测样品中游离脂肪酸的量。

【特点】

蒸馏水作为样品时,吸光值在0.07以下。

检测已知浓度血清样品时,浓度为已知浓度±15%以内。

【试剂盒组成】

显色剂A————————–10ml用×6瓶

显色剂A溶解液——————-65ml×1瓶

显色剂B————————–20ml用×6瓶

显色剂B溶解液——————-130ml×1瓶

标准液(油酸 1mEq/l) ————-10ml×1瓶

 

【使用方法】

【试剂的配制】

显色试剂A:

1瓶显色剂A(10ml用)溶解于10ml显色剂A溶解液中,得到显色试剂A。

显色试剂B:

1瓶显色剂B(20ml用) 溶解于20ml显色剂B溶解液中,得到显色试剂B。

标准液:

附带的标准液可直接使用,也可经稀释作为标准系列使用。

【标准操作法】

向微孔板内添加4μl样品和80μl显色试剂A,充分混合,在37℃加热10分钟。加入160μl显色试剂B,在37℃加热10分钟。以此作为对照空白值,测量样品及标准液的吸光值。

【检测波长】

550nm (进行双波长检测时,主波长为546nm,副波长为660nm)

 

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WAKO LabAssay™ Creatinine 肌氨酸酐定量检测试剂盒

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LabAssay™ Creatinine 肌氨酸酐定量检测试剂盒

【摘要】

肌氨酸酐是肌肉中肌酸与ATP发生反应后所生成的代谢产物。

肌氨酸酐大部分在肾脏循环时被过滤,不再被吸收而被排出体外。肾功能障碍和肌肉中能量代谢变化时,样品中肌氨酸酐的量发生变化。

【检测原理】

向样品中加入除蛋白剂,离心分离,回收上清。上清中加入苦味酸及氢氧化钠溶液,在碱性条件下,肌氨酸酐和苦味酸发生缩合,产生橙红色的缩合物。测量这个橙红色缩合物的吸光值,计算样品中的肌氨酸酐浓度。

 

290-65901 LabAssay (TM) 肌氨酸酐[Jaffe′法]研究试剂

肌氨酸酐是由存在于肌肉、神经内的磷酸肌酸直接产生,或由肌酸脱水产生,经肾毛细血管球过滤后被排除体外的代谢产物。利用Jaffe法,在碱性条件下,通过检测苦味酸与肌氨酸酐反应生成的橙红色色素检测样品中肌氨酸酐含量。

 

【特点】

蒸馏水作为样品时,吸光值为0.010~0.020。

使用已知浓度的血清进行检测时,在已知浓度的±10%以内。

【试剂盒组成】

除蛋白剂————————150ml×1瓶

苦味酸————————–50ml×1瓶

0.75mol/L 氢氧化钠溶液———-50ml×1瓶

标准液 (肌氨酸酐10mg/dl) ——15ml×1瓶

【试剂的制备】

除蛋白剂・苦味酸・0.75mol/L 氢氧化钠溶液:全部都可以直接使用

标准液: 附带的标准液可直接使用,或稀释后作为系列标准液。

【标准操作法】

将300μl除蛋白剂和50μl样品在样品管中混合,室温放置10分钟,离心分离(2,500rpm以上反应10分钟),回收上清。

向酶标板的孔中加入100μl上清,再加入50μl苦味酸和50μl 0.75mol/L氢氧化钠溶液,在25~30℃反应20分钟。

作为空白对照,检测样品及标准液的吸光值。

【检测波长】

520nm

 

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